芽孢桿菌產(chǎn)β-甘露聚糖酶的純化及其穩(wěn)定性研究.pdf_第1頁
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1、天津大學碩士學位論文芽孢桿菌產(chǎn)β甘露聚糖酶的純化及其穩(wěn)定性研究姓名:劉躍申請學位級別:碩士專業(yè):化學工程指導教師:齊崴20080501ABSTRACTpMannanaseisanimponanthemicellulase,whichiswidelyusedandusuallyproducedbymicrobialfennentationmethodInthisthesis,6rstly,thefennentationmediumwass

2、implifiedandoptimized,andthepuri6edenzymewasobtainedbysepa眥ingandpuri母ingThen,thecirculardichroismandthepredictionofproteinsecond習ⅡystnlcturewereemployedininVeStigatingthesmJcturesandstabilizationofp’mannanaseFinally,the

3、stabili妙ofspray—d巧ingproductwasimprovedbyaddingstabilizerandoptimizingoperatingparametersThemainresults、Ⅳereshownasfollowing:Theni仃ogensources,carbonsourcesandin6rganicsaltsofthefermentationmediumwerescreenedandoptimized

4、,thesimpli行edfementationmedium、vasdete徹inedTheunitenzymeactivi哆costof行nalfermentativesolutiondeceasedabout63%comparingwiththatbeforeoptimization,whichsuggestedthatthebenefitwaslargelyincreasedMeanwhile,thepigmentandimpur

5、i夠contentsofthefe徹entatiVesolutionwereobviouslylowerthanthatbeforeoptimization,whichisbeneficialtothesubsequentenzymerefiningThep—mannanaseofelec協(xié)ophoreticpuri夠wasprepared仔omcmdeenzymeby鋤moniumsulfateprecipitation,UF,DEA

6、E一52sepharose,SephadexG100,andhydroxyapatitechromatographyThemolecularweightofpmannanaseestimatedmrou曲GECisconsistcntwiththatthrou曲SDSPAGE,whichisabout39I(DaFoursequenceanalysismethods—APSSP2,SSPR04,PSIPREDandPHDwereused

7、topredicttheseconda巧structureandsomepropertiesofpmannanasebasedonitsaminoacidsequenceTheresultsindicatedthepIofBmannanasewas5505andthemoIecularweightwas380054Thehydrophobici夠curVeandtitrationcurvewerealsopredicted甲ll‘‘●一

8、lnrougnmVestlgatmgchangesmseconda拶structureandenzymeactivityofp。mannanaseatdifferenttemperatureandpHbyfarUVcirculardichroism,theeffectsofseconda巧stllJctureonenzymestabilizationwerepreIiminarilystudiedTheseconda叫stmcturer

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