1、背景和目的：近年來，對IgA腎病(IgA nephropathy，IgAN)分子無創(chuàng)標(biāo)志物的研究成為熱點(diǎn)。尿液因其無創(chuàng)、來源方便，獲取簡單，更是為尋求無創(chuàng)分子標(biāo)志物來源的熱點(diǎn)。課題組前期通過使用Raybiotech蛋白芯片篩選，發(fā)現(xiàn)IgA腎病組尿上清angiostatin、lyve-1是IgAN表達(dá)差異生物標(biāo)志物。Angiostatin是纖溶酶原的蛋白水解片段，是抑制血管生成作用的最強(qiáng)因子，在非糖尿病腎病患者和動物模型中均發(fā)現(xiàn)其水平升高

2、。Lyve-1是淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞透明質(zhì)酸受體1，是淋巴內(nèi)皮特異標(biāo)志物，與腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)，在淋巴透明質(zhì)酸(hyaluronic acid，HA)轉(zhuǎn)運(yùn)中起作用。在IgA腎病中HA主要沉積在腎乳頭、新月體及損傷腎小管周圍，并與蛋白尿、肌酐清除率及腎功能惡化程度相關(guān)，lyve-1在腎臟損傷過程中在HA的過表達(dá)中發(fā)揮的作用值得進(jìn)一步研究。本研究通過擴(kuò)大樣本量，檢測IgAN尿上清angiostatin、lyve-1的水平，明確尿angiostatin、

3、lyve-1在評估IgAN疾病嚴(yán)重程度上的價值。
　　方法：共納入腎穿刺活檢診斷為IgAN患者190例為IgAN組，非IgAN疾病對照組(disease control，DC)患者173例，健康對照組40例。其中177例IgAN患者樣本用于檢測尿上清angiostatin水平，107例IgAN患者樣本用于檢測尿上清lyve-1水平，兩者重合IgAN患者樣本94例。其中157例DC組患者樣本用于檢測尿上清angiostatin水平，

4、46例DC組患者樣本用于檢測尿上清lyve-1水平，兩者重合DC組患者樣本30例。使用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)技術(shù)檢測尿上清angiostatin、lyve-1濃度。對IgAN患者進(jìn)行隨訪，評價尿angiostain與lyve-1反映疾病嚴(yán)重程度和預(yù)后的價值。
　　結(jié)果：將尿上清angiostatin、lyve-1水平進(jìn)行尿肌酐濃度校正，單位分別為ng/mg、pg/mg表示，發(fā)現(xiàn)IgAN組angiostatin(113.38(51.00，

5、327.64)vs620.61(126.00,1644.93),P＜0.001)、lyve-1(634.5(371.78,908.64)vs888.37(569.82，1563.65)，P＜0.01)顯著低于DC組。
　　對IgAN組患者進(jìn)行CKD分期，比較不同CKD分期組間尿angiostatin與lyve-1水平差異，發(fā)現(xiàn)IgAN組CKD3期以上患者尿angiostatin水平顯著高于CKD1期(CKD3期：182.68(70

6、.38,466.12)vs CKD1期：82.15(34.80,147.28),P＜0.01;CKD4期：275.81(211.08,521.24)vs CKD1期：82.15(34.80,147.28),P＜0.001)，CKD1期和CKD2期組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;IgANCKD4期患者尿lyve-1水平高于CKD1期(849.059684.27，1363.38)vs527.80(220.27，682.04)，P＜0.01）。而DC組

7、患者不同CKD分組間尿angiostatin、lyve-1水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　根據(jù)Lee氏分級對IgAN進(jìn)行分組發(fā)現(xiàn)，IgAN腎病Lee氏分級Ⅳ-Ⅴ級組尿上清angiostatin水平顯著高于Lee氏分級Ⅰ-Ⅱ級組(220.14(93.25，561.78)vs44.11(29.07,247.53)ng/mg,P＜0.01)和Ⅲ級組(220.14(93.25,561.78)vs73.68(39.14，196.28)，P＜0.

8、001），Lee氏分級Ⅰ-Ⅱ級組和Ⅲ級組間尿angiostatin水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。IgAN腎病Lee氏分級Ⅳ-Ⅴ級組尿上清lyve-1水平顯著高于Lee氏分級Ⅲ級組(733.35(509.46，961.20)vs446.11(201.54，772.29)，P＜0.01)，其余各組間尿lyve-1水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。根據(jù)牛津分型對IgA腎病患者按系膜增生(M)、內(nèi)皮增生(E)、節(jié)段硬化/球囊粘連(S)、小管壞死/間質(zhì)纖維化(T)病

9、變進(jìn)行分組分析，M1組患者尿angiostatin水平高于M0組(192.30(71.82，545.25)vs88.16(42.00，223.37)ng/mg，P＜0.01)，lyve-1水平在兩組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與T0組(66.75(34.17，211.46))相比，T1組(103.75(63.64，198.59)，P＜0.05)和T2組尿angiostatin水平(247.53(103.75，589.02)，P＜0.001)明顯

10、升高;T2組尿lyve-1水平明顯高于T0組(754.23(561.48，1048.69)vs474.16(218.77，729.05)，P＜0.01），其余各組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，E、S病變評分分組組間差異未見統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　進(jìn)一步比較IgAN組患者尿上清angiostatin、lyve-1水平與臨床病理指標(biāo)相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)尿angiostatin、lyve-1水平與eGFR成負(fù)相關(guān)，與U-Prot、腎小球硬化的比例正相關(guān)成正相關(guān)

11、。為了確定影響尿angiostatin、lyve-1水平的臨床病理因素，我們使用多重線性回歸模型。發(fā)現(xiàn)24h蛋白尿排泄量、性別、腎小管萎縮和間質(zhì)纖維化程度與尿angiostatin水平的獨(dú)立危險因素，24h蛋白尿排泄量、性別為影響尿lyve-1水平的獨(dú)立危險因素。
　　為了評估尿上清angiostatin、lyve-1水平對IgAN中疾病進(jìn)展的預(yù)后作用，我們根據(jù)IgAN患者angiostatin、lyve-1中位數(shù)將IgAN患者分

12、成兩組，結(jié)果顯示尿上清angiostatin＞109.55ng/mg者腎臟預(yù)后較差(P＜0.01);而根據(jù)尿上清lyve-1分組，兩組患者預(yù)后差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論：IgA腎病患者臨床病理表現(xiàn)較重者尿上清angiostatin、lyve-1水平高，說明尿上清angiostatin、lyve-1能夠反映疾病嚴(yán)重程度。尿angiostatin水平高者預(yù)后較差。綜上所述，尿上清angiostatin、lyve-1有可能反映IgA腎