1、目的：復(fù)制大鼠 Marmarou’s閉合性腦損傷模型，研究大鼠創(chuàng)傷性腦損傷后血清及腦組織中炎性細(xì)胞因子的表達(dá)變化，探尋腦損傷生物標(biāo)志物，為創(chuàng)傷性腦損傷臨床診斷、治療及預(yù)后評估提供理論基礎(chǔ)。
　　方法：選雄性 SD大鼠隨機(jī)分為手術(shù)對照組及損傷后1h、4h、8h、12h、24h、48h、72h組，復(fù)制 Marmarou’s分級腦損傷模型。分別進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)評價、H&E染色、焦油紫染色和酯化銀染色進(jìn)行病理學(xué)觀察，測定腦組織及血清中MDA

2、含量及MPO、SOD活性，檢測血腦屏障通透性的改變；采用 QAR-CYT-3芯片和 ELISA技術(shù)檢測炎性細(xì)胞因子在閉合性腦損傷中的變化。
　　結(jié)果：
　　1.臨床表現(xiàn)：輕度損傷組大鼠于打擊后出現(xiàn)短暫呼吸暫停、心跳加速，但迅速恢復(fù)；中度損傷組大鼠95只，其中6只（6.31％）于打擊后死亡，11只（11.58%）于打擊后出現(xiàn)抽搐并伴有呼吸暫停，持續(xù)約30s，無驚厥；重度損傷組大鼠125只，其中41只（32.8%）于打擊后全身抽

3、搐、心跳停止死亡，68只（80.95%）出現(xiàn)抽搐并伴有呼吸暫停，持續(xù)約5min，28只（33.33%）出現(xiàn)驚厥，持續(xù)7-8s。
　　2.神經(jīng)行為學(xué)評價：損傷后各組大鼠平衡能力、行走、逃避和四肢功能均較損傷前有所減弱， mNSS評分結(jié)果顯示，重度損傷組評分最高，中度損傷組次之，輕度損傷組最低，隨時間延長，神經(jīng)行為學(xué)功能逐漸恢復(fù)，評分下降，至48h，輕度損傷組基本恢復(fù)正常。
　　3.病理學(xué)改變：輕度損傷組大鼠大體病理學(xué)無明顯改變

4、，腦干偶見少量蛛網(wǎng)膜下腔出血；中度損傷組蛛網(wǎng)膜下腔出血明顯，主要分布在腦底及腦干，無挫傷，切面偶見雙側(cè)腦室少量出血；重度損傷組可見大量蛛網(wǎng)膜下腔出血，主要分布在腦底、小腦及腦干，切面可見胼胝體點(diǎn)狀出血及雙側(cè)腦室出血，頂葉偶見輕微挫傷。H&E染色可見手術(shù)對照組大鼠海馬區(qū)神經(jīng)元排列整齊，胞核清晰呈淡紫色，包漿呈淡粉色。輕度損傷組大鼠在損傷后1~4h時， CA1區(qū)錐形細(xì)胞腫脹變圓，排列疏松，包漿淡染；損傷后8h，海馬 CA1區(qū)出現(xiàn)散在分布的紅

5、色神經(jīng)元；損傷后12h，壞死神經(jīng)元細(xì)胞增多，胞核固縮細(xì)胞固縮成三角形，呈強(qiáng)嗜酸性。中、重度損傷組病理學(xué)改變較輕度損傷組明顯，壞死神經(jīng)元數(shù)量增多。焦油紫染色可見壞死神經(jīng)元呈深紫色，損傷后各組壞死神經(jīng)元分布趨勢同H&E染色。在酯化銀染色中，損傷神經(jīng)元呈黑色，神經(jīng)纖維呈波浪狀改變。
　　4.生化指標(biāo)改變：①TBI大鼠腦組織 MPO活性變化：輕、中、重度損傷組大鼠腦組織 MPO活性分別于損傷后12h、8h和4h開始升高，至24h達(dá)高峰，然

6、后逐漸下降，損傷程度越重，升高幅度越明顯，與對照組相比有顯著性差異（P＜0.05或P＜0.01）。
　?、赥BI大鼠腦組織及血清 SOD活性變化：損傷后各組大鼠腦組織SOD活性于8h開始降低，損傷后12h達(dá)低谷，然后逐漸恢復(fù)，損傷程度越重，降幅越明顯。損傷后8~48h，損傷各組大鼠腦組織 SOD活性均低于對照組，有顯著性差異（P＜0.05或 P＜0.01）。損傷后72h，損傷各組腦組織 SOD活性恢復(fù)正常，與對照組相比無顯著性差異

7、（P＞0.05）。損傷后各組大鼠血清 SOD活性逐步降低，至12h達(dá)低谷，然后逐漸恢復(fù)，變化大體同腦組織SOD活性改變一致。
　?、跿BI大鼠腦組織及血清中 MDA含量的變化：損傷后各組大鼠腦組織 MDA含量逐漸上升，至12h達(dá)高峰，然后逐漸下降。與手術(shù)對照組相比，損傷后8h，輕度損傷組腦組織 MDA含量升高；損傷后1~12h，中度損傷組腦組織 MDA含量逐步上升；損傷后1~72h，重度損傷組腦組織 MDA含量均升高，與手術(shù)對照組

8、相比差別均有有顯著性差異（P＜0.05或 P＜0.01）。損傷后各組大鼠血清 MDA含量逐漸上升，至8~12h達(dá)高峰，然后逐漸下降。損傷后12~24h，輕度損傷組血清MDA含量升高；損傷后12~48h，中度損傷組血清 MDA含量升高；損傷后1~72h，重度損傷組血清MDA含量升高，與手術(shù)對照組相比，差別均有顯著性差異（P＜0.05或P＜0.01）
　　5.血腦屏障的改變：腦皮質(zhì)EB含量檢測結(jié)果顯示，大鼠血腦屏障通透性在損傷后迅速增

9、加，至4h達(dá)高峰，然后逐漸下降。損傷后4~48h，輕度損傷組大鼠血腦屏障通透性均高于手術(shù)對照組，差別有顯著性差異（P＜0.01）。中、重度損傷組大鼠血腦屏障通透性均高于手術(shù)對照組和輕度損傷組（P＜0.05或 P＜0.01）。重度損傷組大鼠各組血腦屏障通透性均高于中度損傷組，差別有顯著性差異（P＜0.05或P＜0.01）。
　　6.細(xì)胞因子的檢測：①IL-10：腦損傷組大鼠血清 IL-10含量呈先上升后下降而后逐漸恢復(fù)趨勢。損傷后8

10、h，中度損傷組大鼠血清 IL-10含量升高，與手術(shù)對照組相比有顯著性差異（P＜0.05）；損傷后24h，輕、中度損傷組血清 IL-10含量下降，與手術(shù)對照組相比有顯著性差異（P＜0.05）；至72h，輕、中度損傷組血清 IL-10含量逐漸恢復(fù)正常。損傷組大鼠海馬組織IL-10表達(dá)先升高后下降。損傷后24h，輕度損傷組IL-10含量升高，與手術(shù)對照組相比有顯著性差異（P＜0.05），而后逐漸下降。損傷后8~12h，中度損傷組IL-10含量

11、升高，與手術(shù)對照組、輕度損傷組相比均有顯著性差異（P＜0.05），而后逐漸下降。損傷后4h，重度損傷組 IL-10含量升高，與手術(shù)對照組相比有顯著性差異（P＜0.05），然后逐漸下降，于12h到達(dá)最低點(diǎn)，與手術(shù)對照組相比有顯著性差異（P＜0.05或 P＜0.01），損傷后24~48h，IL-10含量逐漸恢復(fù)正常。
　?、贔ractalkine：腦損傷后，輕度損傷組大鼠血清Fractalkine含量逐漸下降，至24h達(dá)到低谷，與手術(shù)

12、對照組相比有顯著性差異（P＜0.05），然后逐漸升高；中度損傷組大鼠血清 Fractalkine含量逐漸升高，至24h達(dá)到高峰，與手術(shù)對照組、輕度損傷組相比有顯著性差異（P＜0.05）。大鼠海馬組織 Fractalkine的表達(dá)呈先升高后下降趨勢。損傷后12~24h，輕度及中度損傷組 Fractalkine含量升高，與手術(shù)對照組相比有顯著性差異（P＜0.05或 P＜0.01）。損傷后12h，重度損傷組 Fractalkine含量升高，與

13、手術(shù)對照組、輕度損傷組相比均有顯著性差異（P＜0.01）；損傷后24h， Fractalkine含量下降，與中度損傷組相比有顯著性差異（P＜0.05）。
　?、跴rolactin R（PRLR）：腦損傷后，輕度損傷組血清中 PRLR含量呈先升高后下降、隨后又升高趨勢；中度損傷組血清中 PRLR含量先下降，而后逐漸恢復(fù)正常。損傷后8h，輕度損傷組血清中 PRLR含量升高，與手術(shù)對照組相比有顯著性差異（P＜0.05）；中度損傷組 PR

14、LR含量下降，與手術(shù)對照組及輕度損傷組相比有顯著性差異（P＜0.05）。損傷后24h，輕度損傷組 PRLR含量下降，與手術(shù)對照組及中度損傷組相比有顯著性差異（P＜0.05）。損傷后72h，輕度損傷組 PRLR含量升高，與手術(shù)對照組相比有顯著性差異（P＜0.05）。各損傷組海馬組織中PRLR含量升高，4h達(dá)高峰，隨后逐漸下降，恢復(fù)至對照組水平。損傷后4~12h，輕度損傷組 PRLR含量升高，與手術(shù)對照組相比，均有顯著性差異（P＜0.05）

15、。損傷后4h~8h，中度損傷組 PRLR含量升高，與手術(shù)對照組相比有顯著性差異（P＜0.05），損傷后12~24h， PRLR含量逐漸下降，與手術(shù)對照組相比無顯著性差異（P＞0.05），損傷后48~72h， PRLR含量進(jìn)一步下降，與手術(shù)對照組相比有顯著性差異（P＜0.05或 P＜0.01）。損傷后4~8h，重度損傷組 PRLR含量升高，與手術(shù)對照組相比有顯著性差異（P＜0.05），然后逐漸降低，至72h， PRLR含量降低，與手術(shù)對照

16、組、輕度損傷組、中度損傷組相比均有顯著性差異（P＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.成功復(fù)制大鼠分級 TBI動物模型，損傷越重，病理學(xué)改變、急性炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激反應(yīng)及血腦屏障損害越嚴(yán)重。
　　2.腦損傷可引起血清及海馬組織中炎性細(xì)胞因子表達(dá)變化。血清和海馬中檢測到的炎性細(xì)胞因子表達(dá)存在差異，提示腦損傷后引發(fā)的免疫應(yīng)答存在延遲反應(yīng)。
　　3.在血清和海馬中檢測到的差異表達(dá)炎性細(xì)胞因子可能是介導(dǎo)繼發(fā)性腦損傷的關(guān)鍵靶