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1、目的:探討紫杉醇載藥對(duì)人肺癌A549細(xì)胞的作用及其作用機(jī)制,為其臨床應(yīng)用提供一定的依據(jù)。
方法:本實(shí)驗(yàn)采用人肺癌A549細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,選擇合適濃度的游離紫杉醇作為陽(yáng)性對(duì)照藥物,探究紫杉醇載藥對(duì)肺癌A549細(xì)胞的增殖及其機(jī)制。MTT法研究紫杉醇載藥所用的空白材料對(duì)人肺癌A549細(xì)胞是否有毒;以不同濃度的游離紫杉醇及其載藥作用于人肺癌A549細(xì)胞,并設(shè)只有完全培養(yǎng)基的細(xì)胞為陰性對(duì)照,MTT法觀察各個(gè)濃度藥物對(duì)該種腫瘤細(xì)胞的抑制作
2、用,并篩選合適濃度的游離紫杉醇作為陽(yáng)性對(duì)照;Hoechst33342/PI雙染法觀察細(xì)胞凋亡與壞死情況;應(yīng)用Western-blot技術(shù)檢測(cè)Bcl-2和Bax的蛋白表達(dá)情況;應(yīng)用RT-PCR技術(shù)檢測(cè)Bcl-2和Bax的基因表達(dá)情況;應(yīng)用試劑盒法檢測(cè)細(xì)胞上清液中LDH的含量,檢測(cè)細(xì)胞中SOD和MDA的含量。
結(jié)果:紫杉醇載藥所用空白材料對(duì)細(xì)胞無(wú)毒;紫杉醇載藥對(duì)細(xì)胞增殖有抑制作用,并呈濃度依賴性; Hoechst33342/PI雙
3、染結(jié)果顯示,藥物作用濃度越高,細(xì)胞壞死及凋亡程度越大;Westen-blot結(jié)果顯示,Bax的蛋白表達(dá)量與濃度成正比例關(guān)系,Bcl-2的蛋白表達(dá)量與濃度呈反比例關(guān)系;RT-PCR結(jié)果顯示,Bax的基因表達(dá)量與濃度成正比例關(guān)系,Bcl-2的基因表達(dá)量與濃度呈反比例關(guān)系;試劑盒法結(jié)果顯示,藥物濃度越大,上清液中LDH含量越高,細(xì)胞中MDA含量越高,細(xì)胞中SOD含量越低。
結(jié)論:紫杉醇載藥對(duì)人肺癌A549細(xì)胞有抑制作用,并且可將細(xì)胞
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