1、背景:
　　乳腺癌是中國及全世界女性最常見的惡性腫瘤，其死亡率居于惡性腫瘤之首。國家癌癥中心發(fā)布的數(shù)據(jù)顯示，我國女性發(fā)病率最高的惡性腫瘤為乳腺癌，且乳腺癌的發(fā)病率近年來逐年增高。近年來乳腺癌的診療技術(shù)不斷提高，但乳腺癌患者的死亡率仍然無明顯下降趨勢。
　　導(dǎo)致乳腺癌患者死亡的最重要的原因是腫瘤的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移，內(nèi)分泌治療耐藥是乳腺癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的主要原因之一。80％以上的乳腺癌患者雌激素受體呈陽性表達，內(nèi)分泌治療是這類患者應(yīng)用必要的一

2、種全身治療手段。內(nèi)分泌治療藥物的應(yīng)用能有效的延長乳腺癌患者的無病生存期(Disease-free survival，DFS)及總生存期(Overall survival，OS)。但其中也有30-40％雌激素受體陽性的乳腺癌患者在接受內(nèi)分泌治療的過程中或接受內(nèi)分泌治療后出現(xiàn)內(nèi)分泌治療耐藥，具體表現(xiàn)為應(yīng)用藥物一段時間后出現(xiàn)復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移或者原有轉(zhuǎn)移灶較前進展。乳腺癌內(nèi)分泌耐藥的機制已部分明確，2011年一項研究表明，最有效的調(diào)節(jié)ER活性的是狐猴

3、-酪氨酸激酶-3(Lemur tyrosine kinase3，LMTK3)，它通過減少蛋白激酶C(PKC)的活性起作用，LMTK3可以磷酸化AKT，影響PKC/AKT通路，該通路可以調(diào)節(jié)腫瘤細胞的增殖與存活，其活性異常不僅能導(dǎo)致細胞惡性轉(zhuǎn)化，而且與腫瘤細胞的遷移、粘附、腫瘤血管生成以及細胞外基質(zhì)的降解等均相關(guān)。有研究表明，在乳腺癌患者組織中LMTK3的表達程度與患者的腫瘤惡性程度、DFS、OS及內(nèi)分泌治療效果均顯著相關(guān)。
　　根

4、據(jù)乳腺癌內(nèi)分泌耐藥產(chǎn)生時間可將其分為原發(fā)性耐藥和繼發(fā)性耐藥，原發(fā)性耐藥是指對于無轉(zhuǎn)移的乳腺癌患者，自內(nèi)分泌治療結(jié)束起6個月之內(nèi)復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移性乳腺癌患者自內(nèi)分泌治療開始6個月之內(nèi)疾病進展，繼發(fā)性耐藥是指對于無轉(zhuǎn)移的乳腺癌患者，自內(nèi)分泌治療結(jié)束起6個月之后復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移性乳腺癌患者自內(nèi)分泌治療開始6個月之后疾病進展。目前乳腺癌原發(fā)性耐藥與繼發(fā)性耐藥的關(guān)聯(lián)尚不明確，本研究通過收集女性乳腺癌患者臨床特征、病理類型、轉(zhuǎn)移情況等相關(guān)資料，探索乳腺癌內(nèi)分泌

5、耐藥的預(yù)測指標;LMTK3是與乳腺癌內(nèi)分泌耐藥密切相關(guān)的蛋白，但是對于原發(fā)性耐藥和繼發(fā)性耐藥患者組織中LMTK3的表達差異尚不明確，我們通過免疫組織化學法檢測不同耐藥程度乳腺癌患者組織中LMTK3的表達，探討LMTK3在各分組中的表達差異，指導(dǎo)激素受體陽性乳腺癌患者預(yù)后。分析LMTK3陽性組及陰性組中各臨床病理指標差異，探究LMTK3表達的影響因素。
　　目的:
　　1.探索乳腺癌原發(fā)性耐藥與繼發(fā)性耐藥相關(guān)預(yù)測指標;

6、　　2.探索LMTK3在乳腺癌不同耐藥組表達差異，指導(dǎo)乳腺癌患者預(yù)后;
　　3.分析LMTK3陽性組及陰性組中各臨床病理指標差異，探究LMTK3表達的影響因素。
　　4.分析比較LMTK3陽性組及陰性組之間DFS及OS差異，比較LMTK3表達水平是否影響預(yù)后。
　　方法:
　　收集山東大學第二醫(yī)院在2004.01-2016.06期間有復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移情況女性乳腺癌患者作為內(nèi)分泌耐藥組，及自2006.01-2009.08起

7、至今無復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移情況的女性乳腺癌患者作為內(nèi)分泌治療敏感組，即對照組，其中內(nèi)分泌耐藥組根據(jù)耐藥出現(xiàn)時間分為原發(fā)性及繼發(fā)性耐藥組。收集患者發(fā)病年齡、發(fā)病側(cè)別、體重、初潮年齡、絕經(jīng)狀態(tài)、哺乳時間、家族史、慢性病史、腫瘤TNM分期、腫瘤直徑、組織學分級、Luminal分型等信息進行數(shù)據(jù)分析。提取其中47例患者腫瘤組織，經(jīng)福爾馬林固定、石蠟包埋后用于雌激素受體(Estrogen receptor，ER)、孕激素受體(Progesterone Rec

8、eptor，PR)、人表皮生長因子受體-2（Human epidermal growthfactor receptor-2，HER-2）、 Ki67及LMTK3免疫組織化學監(jiān)測。入組標準:于山東大學第二醫(yī)院接受手術(shù)，按計劃完成輔助化療/放療，術(shù)后病理示ER陽性并行內(nèi)分泌治療。排除標準:未完成規(guī)定治療方案，術(shù)后病理示ER陰性，未行內(nèi)分泌治療。
　　應(yīng)用x2檢驗分析分類變量與內(nèi)分泌耐藥及LMTK3表達關(guān)系，應(yīng)用獨立樣本t檢驗分析連續(xù)變

9、量與內(nèi)分泌耐藥及LMTK3表達關(guān)系，單因素分析具有統(tǒng)計學意義的變量應(yīng)用二元Logistic回歸進行多因素分析。采用Kaplan-Meier法分析及Log-rank檢驗分析LMTK3陽性組及陰性組生存差異。以p＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)果:
　　1.基本特征描述:
　　根據(jù)入組標準，收集自2004.01-2016.06期間于山東大學第二醫(yī)院乳腺外科治療的乳腺癌患者72例，其中21例為原發(fā)性耐藥患者，15例為

10、繼發(fā)性耐藥患者，36例為內(nèi)分泌敏感患者。
　　2.內(nèi)分泌耐藥影響因素分析:
　　2.1單因素分析
　　2.1.1耐藥組與敏感組影響因素分析
　　與敏感組相比，耐藥組發(fā)病年齡較小(t=-2.791，P=0.007)，且發(fā)病年齡≤50歲的比例較高(x2=6.854，P=0.009)，初潮年齡≤14歲比值較高(x2=5.672，P=0.017)，且Ki67＞14％比例較高(x2=9.873，P=0.002)，Lumin

11、al B型患者較Luminal A型多(x2=9.873，P=0.002)，HER-2陽性比例較高(x2=4.417，P=0.045)，LMTK3陽性率較高(x2=7.685，P=0.006)。發(fā)病側(cè)別、生育次數(shù)、哺乳時間、絕經(jīng)狀態(tài)、家族史、慢性病史、腫瘤長徑、體重值、TNM分期、ER、PR表達無明顯差異。
　　2.1.2原發(fā)性耐藥組與繼發(fā)性耐藥組影響因素分析
　　與繼發(fā)性耐藥組相比，原發(fā)性耐藥組的哺乳時間較長(t=1.56

12、8，P=0.049)，Ki67＞14％的比例較高(x2=5.487，P=0.032)，Luminal B型患者較Luminal A型多(x2=5.487，P=0.032)，LMTK3陽性率較高(x2=5.445，P=0.038)。發(fā)病年齡、發(fā)病側(cè)別、生育次數(shù)、初潮年齡、絕經(jīng)狀態(tài)、家族史、慢性病史、腫瘤長徑、體重值、TNM分期、ER、PR、HER-2等指標無明顯差異(P＞0.05)。
　　2.2多因素分析
　　Logistic

13、回歸分析發(fā)現(xiàn)，可作為內(nèi)分泌耐藥獨立預(yù)測指標的因素有:Ki67＞14％(OR=5.461,95％, CI:1.346-22.152)、LMTK3陽性(OR=5.602,95％CI:1.017-16.959)。
　　3.LMTK3表達影響因素分析:
　　與LMTK3表達陰性組相比，陽性組初潮年齡較小，且初潮年齡≤14歲比值較高(x2=6.421，P=0.011)，Ki67＞14％比例較高(x2=4.182，P=0.041)，Lu

14、minalB型患者較LuminalA型多(x2=4.664，P=0.031)。發(fā)病年齡、發(fā)病側(cè)別、生育次數(shù)、哺乳時間、絕經(jīng)狀態(tài)、家族史、慢性病史、腫瘤長徑、體重值、TNM分期、ER、PR、HER-2表達水平無明顯差異。
　　4.LMTK3陽性組及陰性組生存差異分析
　　與LMTK3陰性組相比，LMTK3陽性組無病生存期較短(x2=10.388，P=0.001)，但總生存期無明顯統(tǒng)計學差異(x2=0.801，P=0.371)。

15、
　　結(jié)論:
　　1.在接受內(nèi)分泌治療的激素受體陽性的乳腺癌患者中，年齡≤50歲、Ki67比值＞14％、初潮年齡≤14歲、HER-2陽性、LMTK3陽性、分子分型為LuminalB型患者更易發(fā)生內(nèi)分泌耐藥;
　　2.在內(nèi)分泌耐藥患者中，哺乳時間長、Ki67比值＞14％、LMTK3陽性表達、分子分型為Luminal B者更易發(fā)生原發(fā)性耐藥，即更早出現(xiàn)復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移情況。
　　3.可作為內(nèi)分泌耐藥獨立預(yù)測指標的因素有:K