1、本論文從來(lái)源于我國(guó)南海、資源豐富、價(jià)格適中的海參品種梅花參的體壁中提取分離純化得到了一種巖藻聚糖硫酸酯，確定了其最佳制備工藝；采用金屬離子催化的氧化降解法和酸降解法制備得到一系列梅花參巖藻聚糖硫酸酯降解產(chǎn)物，并對(duì)其進(jìn)行化學(xué)成分及含量分析和抗凝血活性的研究，為梅花參巖藻聚糖硫酸酯的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立提供基礎(chǔ)，也為我國(guó)開(kāi)發(fā)新型的海參抗凝血藥物提供科學(xué)依據(jù)。
　　采用堿解和酶解反應(yīng)相結(jié)合的方法對(duì)梅花參體壁進(jìn)行處理得到游離多糖，經(jīng)除蛋白、沉淀

2、、鹽析分級(jí)、超濾等純化手段制備得到梅花參巖藻聚糖硫酸酯（FUC）。堿解-酶解聯(lián)用的方法優(yōu)于堿解、酶解和酶解-堿解等工藝路線。正交試驗(yàn)篩選出了堿解工藝條件和酶處理工藝條件。等電點(diǎn)沉淀法可以有效去除蛋白質(zhì)。最終確定提取純化巖藻聚糖硫酸酯的最佳工藝為：40±2℃條件下用8倍量（v/w）的0.5 M NaOH堿解3小時(shí)；按照藥材投量加入木瓜蛋白酶0.5％（w/w），50±2℃攪拌酶解6 h，反應(yīng)液pH值為6.5，經(jīng)堿解-酶解的處理后的提取液，調(diào)

3、節(jié)pH值至2.5，4℃靜置不超過(guò)4 h，離心（4000 rpm?30 min）去沉淀，調(diào)節(jié)溶液pH值至中性，上清液經(jīng)過(guò)三步醇沉-鹽析，超濾，冷凍干燥，即得到梅花參巖藻聚糖硫酸酯（FUC）。
　　采用金屬離子催化的氧化降解法和酸降解法制備得到10個(gè)梅花參巖藻聚糖硫酸酯降解產(chǎn)物（dFUC1~10）。該降解方法簡(jiǎn)單，條件溫和，反應(yīng)可控，收率較高。
　　本論文制備得到的梅花參巖藻聚糖硫酸酯及其降解產(chǎn)物均具有一定的抗凝活性，其中，巖藻

4、聚糖硫酸酯延長(zhǎng)APTT的能力強(qiáng)于其降解產(chǎn)物。巖藻聚糖硫酸酯降解產(chǎn)物dFUC-1對(duì)PT及Fib的幾無(wú)影響或與APTT變化趨勢(shì)一致，具有開(kāi)發(fā)為良好抗凝藥物的潛力。
　　利用高效凝膠過(guò)濾色譜法（HPSEC）測(cè)定梅花參巖藻聚糖硫酸酯及其降解產(chǎn)物分子量，利用不同的解聚方法可獲得不同分子量的降解產(chǎn)物，且分子量分布較小。利用三氟乙酸（TFA）水解，明膠氯化鋇法測(cè)定梅花參巖藻聚糖硫酸酯及其降解產(chǎn)物硫酸酯基的含量，梅花參多糖富含硫酸酯基，且解聚未引