1、霍亂弧菌屬于革蘭氏陰性菌，能游動(dòng)，兼性厭氧彎曲桿菌，人類(lèi)傳染病霍亂的致病微生物，可引起急性腸道感染，水樣腹瀉（1-6升/小時(shí)）和嘔吐，導(dǎo)致嚴(yán)重脫水和死亡，在衛(wèi)生條件較差的地區(qū)如重災(zāi)區(qū)易爆發(fā)。研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)霍亂弧菌進(jìn)入人體內(nèi)定殖于小腸，經(jīng)腸道內(nèi)膽汁酸分子的刺激，使TcpP單體形成二聚體，激活毒素調(diào)控基因toxT的表達(dá)，進(jìn)而產(chǎn)生霍亂毒素。而TcpP周質(zhì)空間二硫鍵的形成對(duì)于自身二聚體的形成十分關(guān)鍵。無(wú)論真核生物還是原核生物，分泌蛋白正確二硫鍵的

2、形成對(duì)于蛋白功能具有關(guān)鍵影響，而二硫鍵異構(gòu)酶介導(dǎo)產(chǎn)生正確二硫鍵。在革蘭氏陰性菌的周質(zhì)空間的二硫鍵氧化還原酶類(lèi)（Dsb家族），決定底物蛋白二硫鍵的形成。
　　本研究旨在探索霍亂弧菌VcDsbC蛋白的功能以及膽鹽對(duì)VcDsbC功能的影響。大腸桿菌DsbC蛋白目前研究十分清楚，本研究以EcDsbC作為對(duì)照，探究VcDsbC功能。本研究進(jìn)行了VcDsbC以及EcDsbC蛋白的表達(dá)與純化，并制備了VcDsbC多克隆抗體;通過(guò)等溫滴定量熱技術(shù)

3、，發(fā)現(xiàn)?；悄懰?TC)與VcDsbC或EcDsbC之間存在互作;VcDsbC具有較高的還原酶活性，而?；悄懰?TC)不影響其還原酶活性;利用霍亂弧菌體內(nèi)異構(gòu)酶功能檢測(cè)方法，證實(shí)VcDsbC具有異構(gòu)酶功能;本研究以錯(cuò)搭水蛭素為底物，建立了體外異構(gòu)酶功能的檢測(cè)方法并且發(fā)現(xiàn)膽鹽抑制了EcDsbC的異構(gòu)酶活性。
　　綜上所述，本研究證明霍亂弧菌DsbC蛋白具有較高還原酶活性以及異構(gòu)酶功能，構(gòu)建β內(nèi)酰胺酶系統(tǒng)檢測(cè)VcDsbC體內(nèi)異構(gòu)酶功能，