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文檔簡(jiǎn)介
1、研究背景和目的:
白色念珠菌是醫(yī)院人群真菌感染的主要致病菌。這一機(jī)會(huì)病原體可以無(wú)癥狀的定植在健康人體的許多部位。由于抗菌藥物的廣泛應(yīng)用,導(dǎo)致了具有耐藥性的白色念珠菌的出現(xiàn)。白色念珠菌耐藥的一個(gè)主要因素是其能夠適應(yīng)不同的環(huán)境,并粘附在其表面以生物膜的形式生長(zhǎng)。生物膜的出現(xiàn)使得臨床治療白色念珠菌感染變得更加困難。生物膜內(nèi)的白色念珠菌對(duì)各種抗真菌藥物如氟康唑、制霉菌素、兩性霉素B和氯己定具有高度的抵抗性。因此,我們迫切的需要尋找一種
2、新的抗真菌方法。藍(lán)光在臨床上廣泛用來(lái)治療痤瘡。近年來(lái),藍(lán)光,特別是波長(zhǎng)在405nm-470nm之間,被用來(lái)殺滅銅綠假單胞菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌等各種病原菌。本實(shí)驗(yàn)中,我們主要討論藍(lán)光對(duì)體外游離和生物膜內(nèi)白色念珠菌及小鼠創(chuàng)面上白色念珠菌的殺滅作用。
研究方法:
1.450-470nm可見光殺滅游離狀態(tài)白色念珠菌的實(shí)驗(yàn)研究:采用平板涂板法檢測(cè)0、12、60、120、240J/cm2能量密度的藍(lán)光對(duì)白色
3、念珠菌的殺滅作用;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)240J/cm2能量密度的藍(lán)光照射后0.5h、1h、2h后白色念珠菌的死亡率。
2.450-470nm可見光殺滅生物膜內(nèi)白色念珠菌的實(shí)驗(yàn)研究:構(gòu)建白色念珠菌生物膜體外模型;將成熟生物膜模型分為空白對(duì)照組和藍(lán)光干預(yù)組兩組,藍(lán)光干預(yù)組采用240J/cm2能量密度的藍(lán)光照射,然后兩組采用Live/Dead染料染色后在激光掃描共焦顯微鏡下觀察并比較藍(lán)光的殺菌效果。
3.450-470nm可見光
4、殺滅小鼠皮膚創(chuàng)面上的白色念珠菌的實(shí)驗(yàn)研究:24只裸鼠隨機(jī)均分為藍(lán)光干預(yù)組、陽(yáng)性對(duì)照組、陰性對(duì)照組三組,全部制作裸鼠背部1cmx1cm皮膚全層缺損創(chuàng)傷模型;于藍(lán)光干預(yù)組、陽(yáng)性對(duì)照組創(chuàng)面上接種20ul濃度為1x109 CFU/ml的白色念珠菌菌液;藍(lán)光干預(yù)組采用240J/cm2能量密度的藍(lán)光分別于第1、2、3天進(jìn)行照射;采用平板涂板法檢測(cè)藍(lán)光殺菌效果;對(duì)各組小鼠創(chuàng)面愈合情況、小鼠體重變化進(jìn)行監(jiān)測(cè)比較,對(duì)小鼠皮膚行蘇木精-伊紅染色并在顯微鏡下
5、觀察炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)情況。
結(jié)果:
1.60J/cm2、120J/cm2、240J/cm2能量密度的藍(lán)光可以有效殺滅體外游離白色念珠菌,P均<0.05;白色念珠菌經(jīng)過(guò)240J/cm2能量密度的藍(lán)光照射后0.5h、1h、2h后與空白對(duì)照組三個(gè)時(shí)相點(diǎn)的死亡率相比,差異顯著,p均<0.05。
2.白色念珠菌在96微孔板中培養(yǎng)3d即可形成成熟的生物膜;240J/cm2能量密度的藍(lán)光可以殺滅生物膜全層內(nèi)的白色念珠菌。<
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