1、本研究應(yīng)用簡單重復(fù)序列區(qū)間擴增（ISSR）分子標記技術(shù)，對中國北方沿海的長竹蟶（Gould）野生群體的遺傳多樣性進行了研究。從群體遺傳學(xué)角度揭示了長竹蟶野生群體的遺傳結(jié)構(gòu)，對其種質(zhì)資源的遺傳多樣性進行了評估，探討了不同野生群體之間的遺傳關(guān)系，以期為保護和合理利用長竹蟶的種質(zhì)資源提供理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下： ⑴通過優(yōu)化ISSR-PCR反應(yīng)體系，從30個ISSR引物中篩選出13個用于ISSR分析。13個引物均顯示出不同程度的多態(tài)

2、性，在5個群體100只個體中共檢測到326個位點，平均每個引物記錄15．4個位點，擴增產(chǎn)物的分子量大多在200 bp～1500 bp之間。 ⑵多態(tài)位點比例和Shannon's指數(shù)是衡量群體遺傳多樣性的重要指標之一。實驗結(jié)果顯示：大連、煙臺、萊州、青島、贛榆5個群體的多態(tài)位點比例分別為60．43％、43．56％、52．15％、49．08％、57．98％。顯示大連、贛榆群體的多態(tài)位點比例明顯高于其他3個群體，結(jié)合Shannon's信

3、息指數(shù)（D和Nei's基因多樣性指數(shù)（h）看，大連與贛榆群體的遺傳多樣性水平較高，青島與萊州群體次之，而煙臺群體是5群體中遺傳多樣性水平最低的。 ⑶通過對大連、煙臺、萊州、青島、贛榆5個群體之間的遺傳相似系數(shù)和遺傳距離進行分析的結(jié)果顯示：煙臺與萊州之間的遺傳距離最大，青島與贛榆群體間的遺傳距離最小。表明在長竹蟶5個自然群體中，青島與贛榆之間的親緣關(guān)系較近，煙臺與萊州群體間的親緣關(guān)系較遠。 ⑷Nei's基因多樣性指數(shù)（h）

4、和Shannon's信息指數(shù)（I）在群體水平上分別為0．1674和0．2530，在物種水平上分別為0．2854和0．4390，顯示出長竹蟶群體擁有較高的遺傳多樣性水平，物種水平的遺傳多樣性高于群體水平。群體內(nèi)遺傳多態(tài)度比例（Hpop/Hsp）為0．5445，群體間遺傳多態(tài)度比例（Hsp-Hpop）/Hsp為0．4555，即長竹蟶群體發(fā)生的遺傳變異有54．45％存在于群體內(nèi)，45．55％的變異存在于群體間，說明群體內(nèi)的變異是導(dǎo)致群體間分化

5、的重要因素。 ⑸利用AMOVA的等級剖分法得出的群體間和群體內(nèi)對總的遺傳變異的貢獻率表明，長竹蟶47．71％的變異發(fā)生在群體間，52．29％的變異發(fā)生在群體內(nèi)，顯著性檢驗顯示長竹蟶群體間和群體內(nèi)均有極顯著的遺傳分化（Фst=0．4770，P<0．001），這與上述4所得結(jié)果的趨勢是一致的。 ⑹長竹蟶5群體之間的基因分化系數(shù)（Gst）均值為0．2889，由Gst估算的基因流（Nm）為1．3194。這表明5群體之間存在著有效

6、的基因流，遺傳漂變不是影響長竹蟶群體遺傳分化的主要因素；引起長竹蟶群體遺傳分化的因素可能與其繁育方式、各居群之間分布不連續(xù)造成的地理隔離、以及人為過度采捕導(dǎo)致資源量減少等因素有關(guān)。 ⑺根據(jù)群體間以及個體間的遺傳距離，用MEGA V4．0軟件中的鄰接法（Neighbor-Joining，NJ），分別對5個群體以及全部樣品的100只個體進行聚類分析的結(jié)果顯示：長竹蟶5群體中，青島和贛榆2個群體先聚成一支，再與大連和萊州群體聚為一支，