1、細(xì)胞周期的準(zhǔn)確調(diào)控對于細(xì)胞生命活動非常重要，熱休克蛋白對細(xì)胞周期的影響尚未見深入的研究報道。本實驗以大腸桿菌熱休克蛋白DnaK和DnaJ為研究對象，探討熱休克蛋白對細(xì)胞周期的影響。首先，檢測△dnaK和△dnaJ突變細(xì)胞的細(xì)胞周期參數(shù)，發(fā)現(xiàn)dnaK基因缺失引起了染色體復(fù)制起始的延遲，而dnaJ的缺失引起了染色體復(fù)制起始的提前。而且，△dnaK和△dnaJ突變體的細(xì)胞大小以及細(xì)胞生長速度與野生型細(xì)胞也有所差異。在缺失突變體中分別恢復(fù)表達D

2、naK和DnaJ蛋白能夠使這些表型缺陷得以恢復(fù)。在野生型細(xì)胞中分別過表達DnaK和DnaJ蛋白使細(xì)胞周期的各個參數(shù)與缺失突變體的參數(shù)呈相反趨勢。通過測定單個細(xì)胞的總蛋白含量和復(fù)制起始蛋白DnaA的含量，發(fā)現(xiàn)△dnaK突變中的這兩個含量相對于野生型細(xì)胞都有所減少;在△dnaK突變細(xì)胞中以質(zhì)粒表達DnaK蛋白時，總蛋白和DnaA含量與野生型細(xì)胞比差別不大;在野生型細(xì)胞中過表達DnaK使總蛋白和DnaA含量都有所提高。而△dnaJ突變、△dn

3、aJ/pdnaJ以及過表達DnaJ后，單細(xì)胞的總蛋白和DnaA含量與野生型細(xì)胞相比無明顯差別。這說明DnaK有可能是通過影響DnaA量來間接影響染色體復(fù)制起始，而DnaJ可能是通過其他途徑影響復(fù)制起始。
　　通過細(xì)菌雙雜交實驗，發(fā)現(xiàn)DnaK和DnaJ與核糖體休眠因子YfiA蛋白之間有相互作用。通過對基因dnaK和dnaJ點突變發(fā)現(xiàn)了DnaK蛋白的核心氨基酸是位于與核苷酸相互作用功能域上的賴氨酸、組氨酸和精氨酸;DnaJ核心氨基酸為