1、復(fù)旦大學(xué)碩士學(xué)位論文NSSR1在小鼠精子發(fā)生和發(fā)育成熟過(guò)程中的表達(dá)調(diào)控及功能姓名：肖平杰申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生理學(xué)及生物物理學(xué)指導(dǎo)教師：徐平20070510復(fù)旦大學(xué)碩士學(xué)位論文NSSRl在小鼠精子發(fā)生及發(fā)育成熟過(guò)程中的表達(dá)調(diào)控及功能中文摘要NSSRl在小鼠精子發(fā)生和發(fā)育成熟過(guò)程中的表達(dá)調(diào)控及功能中文摘要本論文的主要研究方向是探索雄性配子發(fā)生及發(fā)育成熟過(guò)程中，前體mRNA剪接調(diào)控因子NSSRl的表達(dá)調(diào)節(jié)及相關(guān)功能。為此，我們首先詳細(xì)研

2、究分析了NSSRl在生殖系統(tǒng)包括睪丸、附睪、子宮等組織中的表達(dá)分布及其調(diào)控。由結(jié)果可知：1)NSSRl是—個(gè)受發(fā)育過(guò)程調(diào)控的蛋白，其明顯調(diào)控的時(shí)間段主要發(fā)生在性腺分化和性成熟過(guò)程中；2)NSSRl在睪丸中主要表達(dá)于各類生精細(xì)胞中，而在其它類型的細(xì)胞如支持細(xì)胞中幾乎檢測(cè)不到免疫信號(hào)，提示了NSSRl可能直接參與生精過(guò)程的調(diào)控；3)NSSRl在附睪中呈現(xiàn)高表達(dá)，并且同時(shí)有磷酸化和非磷酸兩種狀態(tài)的蛋白；4)NSSRl也表達(dá)于小鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)

3、胞以及卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中，提示NsSRl可能與精子在雌性生殖系統(tǒng)中的最后成熟過(guò)程相關(guān)。NSSRl在睪丸組織中的特異性表達(dá)提示了NSSRl可能參與了生精過(guò)程的調(diào)控，為了探索這一可能性，我們建立了小鼠隱睪癥模型，在這一模型中，由于睪丸持續(xù)位于比陰囊溫度高出57度的腹腔中，生精過(guò)程遭到嚴(yán)重破壞，生精過(guò)程停止在減數(shù)分裂期，這一模型為我們研究NSSRl在生精過(guò)程中的可能功能提供了重要手段。睪丸組織學(xué)分析發(fā)現(xiàn)隱睪側(cè)睪丸的質(zhì)量降低到了正常睪丸的50％左

4、右，而且減數(shù)分裂期的各類生精細(xì)胞大為減少，個(gè)別類型甚至消失了，這些觀察結(jié)果證明了我們成功建立了隱睪癥模型。Westcmblot的結(jié)果表明在隱睪側(cè)睪丸中的非磷酸化NSSRl蛋白明顯上調(diào)，與此同時(shí)SCF、PKC_強(qiáng)、CREM、CREB等基因的選擇性剪接模式發(fā)生了改變。結(jié)合過(guò)量表達(dá)和siRNA干擾等手段，在睪丸來(lái)源的生精細(xì)胞株GClspg中，我們證明了NSSRl能夠調(diào)控CREB基因5號(hào)外顯子的剪接，這一調(diào)控模式和CREB基因在隱睪癥睪丸中的剪