1、目的:
　　本研究旨在探討Laptm5的3'UTR是否具有影響小鼠B細胞淋巴瘤細胞增殖能力的調節(jié)功能，為進一步研究其競爭性內源RNA(ceRNA)功能奠定實驗基礎。
　　方法:
　　1、利用Real-time PCR技術和Western Blot技術在小鼠B細胞淋巴瘤細胞和正常B細胞中檢測Laptm5 mRNA及蛋白水平的表達情況。
　　2、構建Laptm53'UTR野生型及突變型逆轉錄病毒表達質粒，其中突變型表

2、達質粒是將Laptm53'UTR序列中與miR-17-3p互補的序列進行突變。將質粒用脂質體轉染至293T細胞中，包裝得到病毒。用所收集到的病毒感染小鼠B細胞淋巴瘤細胞38B9細胞系，感染后加入嘌呤霉素(Puromycin)篩選，用Real-time PCR法檢測感染效率，評價Laptm53'UTR野生型和突變型序列在細胞內的過表達情況。
　　3、通過細胞學實驗觀察過表達野生型和突變型Laptm53'UTR的小鼠B細胞淋巴瘤細胞增

3、殖情況改變。
　　4、用Real-time PCR法檢測生物信息學預測的其中一個miR-17-3p在小鼠B細胞淋巴瘤細胞和正常B細胞中的表達。分別構建miR-17-3p的表達質粒和含有野生型及突變型Laptm53'UTR序列的熒光素酶融合基因質粒，利用雙熒光素酶報告基因實驗驗證miR-17-3p對Laptm53'UTR的調節(jié)作用。
　　結果:
　　1、在小鼠B細胞淋巴瘤細胞(38B9)中，Laptm5 mRNA水平及蛋

4、白水平均較正常B細胞低，提示Laptm5在B細胞淋巴瘤的發(fā)生發(fā)展中可能存在抑癌作用。
　　2、成功構建野生型和突變型Laptm53'UTR逆轉錄病毒表達質粒，逆轉錄病毒感染和嘌呤霉素篩選后，Real-time PCR結果顯示與空載體對照組比較野生型和突變型Laptm53'UTR均在細胞內得到了高表達。有顯著性統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　3、38B9過表達野生型Laptm53'UTR后，細胞計數(shù)結果顯示與空載體對照組及突

5、變組相比，細胞數(shù)目明顯減少;CCK-8試劑盒檢測結果同樣顯示，過表達Laptm53'UTR組細胞可明顯抑制細胞數(shù)量的增加(P＜0.01)。
　　4、Real-time PCR實驗結果顯示miR-17-3p在小鼠B細胞淋巴瘤細胞中的表達明顯高于正常B細胞。miR-17-3p分別與帶有野生型和突變型Laptm53'UTR的熒光素酶融合基因質粒共轉染后，含有野生型Laptm53'UTR序列的熒光素酶活性明顯低于含有突變型Laptm53'

6、UTR序列者。
　　結論:
　　小鼠B細胞淋巴瘤細胞中Laptm5的表達明顯降低，過表達Laptm53'UTR可抑制小鼠B細胞淋巴瘤細胞的增殖。在小鼠B細胞淋巴瘤細胞中，miR-17-3p的表達明顯升高，且對Laptm53'UTR具有靶向負調節(jié)作用。這一結論提示Laptm53'UTR可能具有競爭性結合miR-17-3p的作用，并進而影響miR-17-3p的其他靶蛋白的表達，這是Laptm53'UTR能夠影響小鼠B細胞淋巴瘤細