1、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bonemarrowstemcells,BMSCs)是一種非常有臨床應(yīng)用價(jià)值的多能干細(xì)胞,起源于胚胎中胚層,幾乎可以在每個(gè)生物個(gè)體的骨髓中獲取,并且在體外試驗(yàn)中已經(jīng)被證實(shí),骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在加入特定誘導(dǎo)劑的培養(yǎng)基中,可以向神經(jīng)元甚至是GABA能神經(jīng)元分化。目前,在神經(jīng)外科領(lǐng)域研究較多的干細(xì)胞分別為:胚胎干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞、臍帶血干細(xì)胞和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。而對(duì)于臨床應(yīng)用來(lái)說(shuō),自體干細(xì)胞移植是最安全的移植方式,并且最佳的種

2、子干細(xì)胞應(yīng)該在良好的分化潛能的基礎(chǔ)之上還具有來(lái)源可靠、豐富的特點(diǎn),胚胎干細(xì)胞因?yàn)槠湓趥惱矸矫娴南拗?神經(jīng)干細(xì)胞因?yàn)閬?lái)源比較匱乏,臍帶血干細(xì)胞因?yàn)槠淇扇〔牡臅r(shí)間窗短暫并且難以保存,都不能作為自體移植的干細(xì)胞源。而骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞不但具有良好的分化潛能,在取材來(lái)源方面更加的穩(wěn)定和簡(jiǎn)便,所以我們選擇了骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞可以從每個(gè)兒童、成人的骨髓中較為簡(jiǎn)易的分離純化,是最為理想的自體移植干細(xì)胞。
　　癲癇在神經(jīng)科一直是常見

3、病和多發(fā)病,據(jù)統(tǒng)計(jì),我國(guó)的癲癇患者目前已經(jīng)多達(dá)數(shù)百萬(wàn),癲癇也已成為神經(jīng)科的第二大常見疾病,在發(fā)病率方面僅低于頭痛。在癲癇的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中,伽馬氨基丁酸(gamma-aminobutyricacid,GABA)能神經(jīng)元的缺失或失功能性變化是主要的病理改變。目前臨床上對(duì)癲癇的治療手段主要為藥物、手術(shù)和神經(jīng)調(diào)控等,大多為針對(duì)癲癇灶的異常放電進(jìn)行對(duì)癥治療。這些方法雖然可以在不同程度上控制癲癇發(fā)作,緩解疾病的發(fā)展。但要想從根本上治療因神經(jīng)細(xì)胞損傷

4、和失功能導(dǎo)致的癲癇,中樞神經(jīng)系統(tǒng)的修復(fù)和再生是必不可少的,因此,促進(jìn)腦組織中GABA能神經(jīng)元的再生和功能的恢復(fù)可能成為治療癲癇的根本策略。
　　雖然骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞自體移植治療癲癇的前景非常光明,但是一個(gè)重要的問(wèn)題就是如何提高骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向GABA能神經(jīng)元分化的分化效率。本實(shí)驗(yàn)小組要做的就是探究骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向GABA能神經(jīng)元的分化機(jī)制,從而改進(jìn)其分化條件,提高分化率,為移植干細(xì)胞治療癲癇打下基礎(chǔ)。在前人對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞和No

5、tch信號(hào)通路的研究基礎(chǔ)上,我們注意到了堿性螺旋-環(huán)-螺旋(basichelix-loop-helix,bHLH)轉(zhuǎn)錄家族中的Mash1基因在調(diào)控神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育、分化的過(guò)程中所起的重要作用。在本實(shí)驗(yàn)中,我們選擇Mash1作為本實(shí)驗(yàn)的靶基因,首先利用化學(xué)合成siRNA,通過(guò)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的方式轉(zhuǎn)染進(jìn)間充質(zhì)細(xì)胞內(nèi),通過(guò)RNA干涉作用降低了Mash1在大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中的表達(dá)。然后誘導(dǎo)低表達(dá)Mash1基因的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向GABA能神經(jīng)元