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文檔簡介
1、隨著生活水平的改善,生殖類疾病,如不孕不育癥的發(fā)生在不斷地增加,因此生殖系統(tǒng)的健康也越來越受到公眾的重視。作為多環(huán)芳香烴(Polycyclic Aromatic Hydrocarbons,PAHs)的代表物,苯并[a]芘(Benzo[a]pyrene,B[a]P)是確定的具有生殖毒作用的有機物。既往有關B[a]P生殖毒性的研究表明,B[a]P暴露會影響大鼠睪丸精液量、精子數(shù)目以及精子存活率。B[a]P會通過氧化應激、參與DNA損傷等途徑
2、對生殖系統(tǒng)發(fā)揮毒作用。維生素E(Vitamin E)是人體當中,最富有的脂溶性抗氧化劑,它能夠參加到氧自由基在體內的反應中,從而致使鏈式反應出現(xiàn)中斷。有資料報道,維生素E的使用能夠促進性激素分泌,使男子精子質量增加。ATP酶是機體中負責傳送信息和傳播能量的重要物質,ATP酶在體內水平的高低,會直接對細胞內外的Ca2+量產(chǎn)生影響。ATP酶活性降低會引發(fā)細胞內Ca2+超載,Ca2+則會引發(fā)膜磷脂降解、線粒體能量生成減少,導致組織功能和代謝紊
3、亂。兒童和PAHs職業(yè)接觸者,作為PAHs的高危人群,目前卻沒有藥物能夠有效預防PAHs帶來的危害。因此本研究用維生素E來探討其是否對B[a]P所引起的雄性SD大鼠的生殖毒作用具有拮抗作用以及作用機制。
目的:
探討維生素E對B[a]P所誘導的、對雄性SD大鼠的生殖毒性是否存在著有效地拮抗作用;通過觀察和檢測染毒大鼠的睪丸組織形態(tài)及組織內ATP酶活性和Ca2+濃度的改變,來探討B(tài)[a]P的生殖毒性發(fā)生機制。并且,通過
4、給予不同劑量的維生素E,來探討維生素E與B[a]P之間是否存在著劑量反應關系。
方法:
將60只4周齡大鼠,隨機地分入到空白對照組、溶劑對照組、B[a]P組、低劑量維生素E(10mg/kg/d)+B[a]P組、中劑量維生素E(50mg/kg/d)+B[a]P組和高劑量維生素E(100mg/kg/d)+B[a]P組中,B[a]P的實驗用量為5mg/kg,持續(xù)灌胃處理30天。B[a]P溶于植物油中備用,溶劑對照組則會給予
5、植物油灌胃。檢測精液的質量,睪丸臟器系數(shù),并觀察睪丸的損傷狀況;使用試劑盒檢測睪丸組織中8-OHdG與MDA含量,SOD與GSH-Px活性以及細胞ATP酶活性,以此觀測睪丸的氧化損傷情況及ATP酶的水平變化;通過對睪丸組織進行HE染色以及彗星實驗,鏡下觀察睪丸形態(tài)學改變及生殖細胞中DNA損傷與否;熒光標記法測量睪丸Ca2+含量變化。
結果:
1、1)B[a]P染毒組與對照組相比,睪丸的臟器系數(shù)、精子數(shù)目和精子的活動度
6、明顯降低,并且精子畸形率出現(xiàn)了增高。
2)高劑量維生素E的使用,使精子質量和睪丸臟器系數(shù)損傷明顯好轉。10 mg/kg/d劑量的維生素E,拮抗效果并不理想。
3)HE染色顯示,B[a]P暴露造成了睪丸組織生精細胞數(shù)量顯著的減少。加入維生素E的各組,生精細胞的數(shù)量明顯增多,維生素E緩解了生殖細胞損傷。
2、B[a]P暴露組較對照組,睪丸組織中SOD、與GSH-Px的活性明顯降低,而MDA與8-OHdG含量出現(xiàn)
7、增高。在中劑量與高劑量的維生素E進行干擾后,SOD與GSH-Px的活性得到明顯改善,MDA與8-OHdG的含量則明顯降低。
3、B[a]P染毒組 Ca2+-Mg2+-ATP酶和Na+-K+-ATP酶活性明顯低于對照組。中、高劑量維生素 E+B[a]P組較B[a]P染毒組,Na+-K+-ATPase與Ca2+-Mg2+-ATPase活性顯著增強。
4、B[a]P染毒組Ca2+濃度增高顯著,50 mg/kg、100 mg
8、/kg維生素E+B[a]P組Ca2+濃度降低明顯,低劑量維生素E組卻未見到明顯變化。
5、彗星實驗發(fā)現(xiàn),B[a]P暴露組彗星數(shù)量明顯多于對照組,并且隨著使用的維生素E劑量的增加,鏡下觀察到的彗星數(shù)目明顯減少。
結論
1、B[a]P暴露誘導的生殖損害可能機制為:
1)大鼠的睪丸組織發(fā)生了生殖細胞的氧化損傷。
2)睪丸中發(fā)生了生殖細胞的DNA氧化損傷,造成了細胞凋亡。
3)睪丸組織
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