1、AIDS是一種主要由HIV-1引起的全球性疾病，安全有效的HIV-1疫苗是預(yù)防和控制AIDS流行的最佳途徑。盡管經(jīng)過多年努力，針對HIV-1有效的疫苗仍然沒有研制成功。在過去的數(shù)十年里，只有在泰國 RV144實驗表明，疫苗雖然沒能控制已感染病毒者的病情進(jìn)程，但實驗組比對照組降低了31％的HIV-1感染率，讓人們看到了研制 HIV-1疫苗的希望。RV144實驗中的免疫策略為金絲雀痘病毒（Canary pox virus，CPV）載體疫苗初

2、免，Gp120蛋白疫苗加強免疫。基于以上免疫策略，我們引入可以形成病毒外殼天然結(jié)構(gòu)的病毒樣顆粒（Virus-like particle，VLP）作為新的疫苗，聯(lián)合DNA疫苗與MVA疫苗，采用DNA初免，MVA/VLP加強免疫的策略來提高疫苗的免疫水平。本文中疫苗的基因設(shè)計是基于中國流行的HIV-1 B/C重組亞型。其中，重組DNA疫苗含有HIV-1 B/C亞型的Gag/Pol/ Env基因，通過正交試驗篩選DNA疫苗最優(yōu)培養(yǎng)條件，并繪制

3、菌種生長曲線，再擴(kuò)大到5L發(fā)酵罐進(jìn)行菌種的發(fā)酵培養(yǎng)，摸索其發(fā)酵工藝路線，并根據(jù)菌種生長狀況選擇最佳的收取菌體的時間，收獲DNA疫苗。HIV-1 B/C亞型重組MVA疫苗感染原代雞胚成纖維細(xì)胞（Chicken embryo fibroblast，CEF），即可在上清中收獲VLP疫苗，我們通過反復(fù)凍融CEF和超聲破碎的方法釋放細(xì)胞中的MVA病毒，并通過超速離心收集病毒，生產(chǎn)重組MVA疫苗。作為重組MVA疫苗的副產(chǎn)物，重組VLP疫苗分泌到上清