巨噬細(xì)胞表型在重癥胰腺炎腎損傷中的表達(dá)及意義.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:
   有研究發(fā)現(xiàn)巨噬細(xì)胞(M(φ))存在兩種不同的激活途徑,在重癥急性胰腺炎(severeacutepancreatitis,SAP)的發(fā)生發(fā)展中起著重要的作用。本研究探討大鼠SAP腎損傷時(shí)M(φ)表型表達(dá)及意義。
   方法:
   雄性Wistar大鼠64只,隨機(jī)分為對(duì)照組(SO組)和SAP組,每組32只,采用逆行胰膽管注射?;悄懰徕c(濃度為5%,4ml/kg)制備SAP大鼠模型,于造模后2、6、12

2、及24h分別取血測(cè)定血漿中測(cè)定尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)的改變。同時(shí)取胰腺和腎臟組織,HE染色觀察胰腺及腎臟組織形態(tài)學(xué)改變,免疫組織化學(xué)鑒定CD68、iNOS、Arg-1在SAP腎臟中的表達(dá),實(shí)時(shí)熒光定量PCR(QRT-PCR)檢測(cè)腎臟組織IL-12、TNF-α、IL-10、TGF-β的mRNA的表達(dá)水平,蛋白質(zhì)印跡法(Westernblotting)檢測(cè)蛋白CD68、iNOS、Arg-1的表達(dá)。
   結(jié)果:
  

3、 SAP造模后,HE染色發(fā)現(xiàn)12h胰腺組織就出現(xiàn)明顯的病理改變,24h炎癥加劇,腎臟的損害也隨時(shí)間的增加呈進(jìn)行性加重。免疫組化及Westernblotting檢測(cè)顯示,SAP組各時(shí)間點(diǎn)腎臟均有CD68的表達(dá)。與SO組相比,M(φ)1相關(guān)蛋白iNOS在造模后2h開(kāi)始升高,并于12h達(dá)高峰;M(φ)2相關(guān)蛋白Arg-1于12h開(kāi)始持續(xù)升高對(duì)抗炎癥反應(yīng)。QRT-PCR結(jié)果顯示,SAP組M(φ)1相關(guān)的炎癥因子IL-12,TNF-α從2h開(kāi)始升

4、高,12h達(dá)高峰;M(φ)2相關(guān)的抗炎因子IL-10,TGF-β則從12h起開(kāi)始表達(dá)增多,24h更加明顯。
   結(jié)論:
   SAP大鼠腎損傷時(shí),腎臟組織M(φ)1相關(guān)的炎性因子IL-12,TNF-α,iNOS表達(dá)量從2h開(kāi)始升高,12h達(dá)高峰,M(φ)2相關(guān)的抗炎因子IL-10,TGF-β,Arg-1表達(dá)量從12h后才開(kāi)始增加,并于24h得到最高觀察值。由此我們推斷:在SAP腎損傷時(shí),12h內(nèi)由經(jīng)典途徑激活的M(φ)

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