1、目的：探討蛋白激酶C(PKC)家族成員PKC α和PKC δ在重癥急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺及肺臟中的動(dòng)態(tài)表達(dá)情況和組織病理改變的關(guān)系。 方法：胰膽管逆行注射牛黃膽酸鈉制成大鼠AP模型，觀察胰腺及肺臟病理學(xué)變化，采用免疫組織化學(xué)檢測(cè)方法分別檢測(cè)PKC α、PKC δ在AP大鼠胰腺和肺臟中的表達(dá)情況，并進(jìn)行對(duì)比分析。采用逆轉(zhuǎn)錄-多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)96只大鼠胰腺組織中PKC mRNA的表達(dá)情況。 結(jié)果：1.免

2、疫組化法測(cè)得PKC α、PKC δ在大鼠急性胰腺炎胰腺組織中的表達(dá)：假手術(shù)組中偶見(jiàn)PKC α和PKC δ陽(yáng)性細(xì)胞，且主要在細(xì)胞漿中表達(dá)，細(xì)胞膜中表達(dá)極少。輕型急性胰腺炎(MAP)組PKC α和PKC δ陽(yáng)性細(xì)胞在胰腺細(xì)胞胞漿及胞膜均有表達(dá)。重癥急性胰腺炎(SAP)組PKC α和PKC δ在胰腺細(xì)胞膜中表達(dá)均呈強(qiáng)陽(yáng)性，細(xì)胞漿中表達(dá)很低。輕型急性胰腺炎模后1，6，12和24h胰腺中PKCα表達(dá)分別為743.88±12.24、741.88±2

3、1.01、782.68±15.13和777.50±17.84低于重癥急性胰腺炎組表達(dá)數(shù)766.00±9.79、799.13±12.8、821.38±15.81和816.13±24.48各時(shí)間點(diǎn)之間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，P,0.01，P,0.01，P(0.01)。假手術(shù)組建模后1，6，12和24h胰腺中PKCa表達(dá)分別為746.75±21.43、746.25±12.71、734±17.58和746.25±15.19與重癥組各時(shí)

4、間點(diǎn)相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01，P<0.01，P<0.01，P<0.01)。假手術(shù)組與輕癥組相比差異在12和24h小時(shí)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，P>0.05，P>0.01，P>0.01)。 2.免疫組化法測(cè)得PKC α、PKC δ在大鼠急性胰腺炎肺臟組織中的表達(dá)：輕型急性胰腺炎建模后1，6，12和24h肺臟組織中PKC α表達(dá)分別為726.31±14.58，729.45±17.64，713.97±20.31，730.

5、15±16.34，與假手術(shù)組各時(shí)間點(diǎn)相比，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。重癥組中1，6，12和24h肺臟組織中PKC α表達(dá)分別為749.21±15.59，781.45±13.79，799.97±16.43，801.15±13.44，與輕癥組各時(shí)間點(diǎn)相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01，P<0.01，P<0.01，P<0.01)。與PKC α相類似，重癥組中PKC δ的表達(dá)在1小時(shí)點(diǎn)開(kāi)始增高，12小時(shí)點(diǎn)到達(dá)高峰，維持時(shí)間較短，24

6、小時(shí)有所減低。 3.RT-PCR法測(cè)得PKC α mRNA和PKC δ mRNA在大鼠急性重癥胰腺炎胰腺組織中的表達(dá)：PKC α mRNA，PKC δmRNA的表達(dá)水平RT-PCR所得到的PKC α、PKC δ和GAPDH產(chǎn)物長(zhǎng)度與預(yù)期一致(擴(kuò)增目的片段長(zhǎng)度PKC α為300bp、PKC δ為153bp、GAPDH為411bp)。PKC α mRNA在MAP組建模后1，6，12和24h胰腺中表達(dá)分別為0.726±0.04，0.7

7、29±0.03，0.851±0.08，0.835±0.06，與假手術(shù)組各時(shí)間點(diǎn)相比，差異在12 h和24 h有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，P>0.05，P>0.05，P>0.05)。SAP組中建模后1，6，12和24h胰腺中表達(dá)分別為0.829±0.05、0.946±0.09、1.097±0.10和1.077±0.16，與輕癥組各時(shí)間點(diǎn)相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01，P<0.01，P<0.01，P<0.01)。與PKC α mRNA

8、表達(dá)相似，PKC δ mRNA表達(dá)量在MAP組高于SO組，SAP組高于MAP組，變化強(qiáng)度略低于PKC α。 結(jié)論： 1.PKC α、PKC δ在SAP早期均升高，與假手術(shù)組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，尤以PKCα升高顯著，PKCα可作為早期診斷SAP的指標(biāo)之一。 2.SAP病程進(jìn)展與PKC α、PKC δ密切相關(guān)。PKC α mRNA、PKC δ mRNA PKC α蛋白和PKC δ蛋白與SAP時(shí)胰腺、和肺