南極磷蝦反式EPA及DHA抗腫瘤作用的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、南極磷蝦因其巨大的生物量及高營養(yǎng)價值(如油脂和蛋白質(zhì)),引起了各國的廣泛關(guān)注。南極磷蝦油因富含ω-3多不飽和脂肪酸、磷脂及蝦青素等活性成分,已經(jīng)作為保健食品成功應(yīng)用于降血壓血脂、保護心腦血管、預(yù)防動脈粥樣硬化等領(lǐng)域。本課題組的前期研究表明,南極磷蝦油具備一定的體外抑制腫瘤細(xì)胞生長的能力,但是作為一種成分復(fù)雜的混合物,其發(fā)揮體外抗腫瘤作用的物質(zhì)基礎(chǔ)至今仍不明確,而且其中具有抗腫瘤活性物質(zhì)的作用機理也有待于進一步深入研究。針對以上問題,本論

2、文主要內(nèi)容如下:
  (1)南極磷蝦油中抗腫瘤活性物質(zhì)的分離純化與結(jié)構(gòu)鑒定。利用溶劑萃取、硅膠層析及高效制備液相色譜等方法,從南極磷蝦油中分離純化得到兩種具備抗腫瘤活性的物質(zhì),并通過LC-MS,F(xiàn)TIR,HRESIMS,1H-NMR,13C-NMR和激光散射拉曼光譜等技術(shù)確定其為反式的二十碳五烯酸(EPA)及二十二碳六烯酸(DHA)。
  (2)考察了南極磷蝦反式EPA及DHA對不同腫瘤細(xì)胞的生長抑制作用。結(jié)果表明,南極磷蝦

3、反式EPA/DHA對HL60、U937、K562、MCF-7、MDA-MB-231、PC-3及SMMC-7721七種不同類型腫瘤細(xì)胞的生長抑制活性比其它三種順式EPA/DHA(來自市售魚油、阿穆爾鱘魚肝油及標(biāo)準(zhǔn)品)強3-7倍。以MCF-7為例,南極磷蝦EPA的IC50值為14.01μM,而其他三種來源EPA的IC50值分別為81.45、82.11及80.51μM;南極磷蝦DHA的IC50值為19.94μM,而其他來源DHA的IC50值分

4、別為73.13、75.31及70.13μM。另外,南極磷蝦反式EPA及DHA對人正常肝細(xì)胞HL7702的生長無抑制作用。
  (3)考察了南極磷蝦反式EPA及DHA誘導(dǎo)MCF-7細(xì)胞凋亡的作用機制。結(jié)果表明,不同藥物濃度處理MCF-7細(xì)胞后,ROS水平隨藥物濃度的增加而升高;隨著處理時間的增加,ROS水平先升高后降低。與順式EPA及DHA標(biāo)準(zhǔn)品相比,南極磷蝦EPA及DHA可誘導(dǎo)產(chǎn)生更多的ROS,而且也可以顯著降低細(xì)胞的T-AOC、

5、GSH及T-SOD水平;南極磷蝦EPA及DHA對人正常肝細(xì)胞HL7702的ROS水平無顯著影響。
  (4)考察了南極磷蝦反式EPA及DHA影響MCF-7的遷移及侵襲的作用機制。結(jié)果表明,南極磷蝦反式EPA對MCF-7的遷移及侵襲能力幾乎無影響,而南極磷蝦反式DHA可顯著下調(diào)MCF-7的遷移及侵襲能力;同時在MCF-7/CD95i細(xì)胞中,南極磷蝦DHA也可以下調(diào)MCF-7/CD95i的遷移及侵襲能力,但下調(diào)效果明顯減弱。隨著DHA

6、濃度的增加,在MCF-7細(xì)胞中CD95與Caveolin-1的相互作用也隨之增強,而且CD95與Caveolin-1的相互作用增強會抑制FAK/Src/PI3K/Akt信號通路,并最終使MMP2的表達下調(diào),從而抑制細(xì)胞的遷移及侵襲。
  綜上所述,本研究明確了南極磷蝦油中抗腫瘤活性的物質(zhì)為反式的EPA及DHA,進一步探究了其誘導(dǎo)MCF-7細(xì)胞凋亡和影響MCF-7的遷移及侵襲的作用機制,這些研究結(jié)果有利于深入揭示南極磷蝦油的營養(yǎng)和藥

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