1、限制生長(zhǎng)保存是植物種質(zhì)離體保存的一種主要方法,限制生長(zhǎng)保存是在保證植物種質(zhì)遺傳完整性的前提下限制試管苗的生長(zhǎng),減少繼代次數(shù),達(dá)到中期保存植物種質(zhì)資源的目的。本研究以南豐蜜橘大果-97種子和楊小-26成年態(tài)莖段為實(shí)驗(yàn)材料,對(duì)南豐蜜橘成年態(tài)莖段的離體培養(yǎng)以及南豐蜜橘限制生長(zhǎng)保存的方案進(jìn)行了探索,初步建立起適合南豐蜜橘種質(zhì)離體保存的技術(shù)方法。主要試驗(yàn)結(jié)果如下:
　　 1.以南豐蜜橘楊小-26成年態(tài)莖段為材料,在不同激素配比的MS培養(yǎng)基

2、進(jìn)行再生芽的誘導(dǎo)和繼代增殖培養(yǎng),確定了最佳的誘導(dǎo)培養(yǎng)基MS+6-BAO.5mg/L+KT0.5mg/L+NAA0.1mg/L,把誘導(dǎo)培養(yǎng)基中的蔗糖濃度由3％提高到6％可以很好的解決再生芽的葉片發(fā)黃、脫落問題;再生芽增殖的最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA0.4mg/L+ZT0.1mg/L+NAA0.05mg/L,增殖系數(shù)可達(dá)5.40。
　　 2.通過正交試驗(yàn)對(duì)供試材料保存4個(gè)月后的存活率與封口材料、溫度和光照強(qiáng)度的關(guān)系進(jìn)行優(yōu)選,初步得到

3、南豐蜜橘適宜的保存條件為牛皮紙+2層聚乙烯膜封口,18℃,400lx弱光照條件下保存。
　　 3.不同培養(yǎng)基養(yǎng)分與蔗糖濃度影響了南豐蜜橘離體保存的效果。結(jié)果表明,低濃度無(wú)機(jī)鹽、高濃度蔗糖可抑制南豐蜜橘保存材料的生長(zhǎng),在1/4MS+60g/L蔗糖的培養(yǎng)基中,南豐蜜橘大果-97種子試管苗保存效果最好,6個(gè)月的保存成活率可達(dá)92％,而楊小-26成年態(tài)莖段保存培養(yǎng)基中的最佳蔗糖與無(wú)機(jī)鹽量為1/2MS+60g/L蔗糖。
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