1、本文對山藥種質(zhì)資源的分步冷凍法和玻璃化法超低溫保存技術(shù)進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。結(jié)果表明：(1)分步冷凍法超低溫保存的最佳技術(shù)體系為：繼代培養(yǎng)60d的試管苗于4℃低溫下鍛煉7d，然后切取1～1.5cm帶芽的幼嫩莖段放入MS+10％DMSO的預(yù)培養(yǎng)基中預(yù)培養(yǎng)7d，以10％DMSO+5％M+5％PVP作冰凍保護(hù)劑，在0℃低溫下對帶芽莖段處理2h，然后在-20℃、-80℃下各處理2h，最后投入液氮保存，保存一定時間后，將材料取出，在37℃水浴中快速化

2、凍，化凍后用MS+5％S的洗滌液洗滌4次，每次10min，后轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基MS+KT2mg·L-1+NAA0.02mg·L-1上，先于暗處培養(yǎng)14d，再轉(zhuǎn)為光培養(yǎng)，即可再生出完整的新植株，再生苗與常溫苗形態(tài)指標(biāo)和生理生化指標(biāo)差異不大。山藥超低溫保存的成活率隨基因型而異，表現(xiàn)出明顯的差異性，其中，B號山藥的相對存活率和成活率最高，達(dá)84.96％和66.95％，南城的相對存活率和成活率最低，僅為29.09％和19.80％；(2)玻璃化法超低

3、溫保存的最佳技術(shù)體系為：繼代培養(yǎng)60d的試管苗于4℃低溫下鍛煉7d，然后切取1～1.5cm帶芽的幼嫩莖段放入MS+10％DMSO的預(yù)培養(yǎng)基中預(yù)培養(yǎng)7d，莖段預(yù)培養(yǎng)后先用60％PVS1在0℃下過渡60min，再用100％PVS1在0℃下脫水60min，最后投入液氮保存，保存一定時間后，將材料取出，在37℃水浴中快速化凍，化凍后用MS+7％S的洗滌液洗滌4次，每次10min，后轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基MS+KT2mg·L-1+NAA0.02mg·L-