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![pH脅迫對(duì)三種養(yǎng)殖對(duì)蝦生理生化指標(biāo)的影響.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/11/8/139a9044-3d7e-4268-8efb-34b5ab415e83/139a9044-3d7e-4268-8efb-34b5ab415e831.gif)
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文檔簡(jiǎn)介
1、養(yǎng)殖水體是對(duì)蝦的生活環(huán)境,水質(zhì)的好壞直接影響對(duì)蝦的生長(zhǎng)和經(jīng)濟(jì)效益。在氨氮、pH、溶解氧、溫度、鹽度等各項(xiàng)常規(guī)監(jiān)測(cè)理化指標(biāo)中,pH是最重要的指標(biāo)之一,是水體化學(xué)性狀和生命活動(dòng)的綜合反應(yīng),能嚴(yán)重影響水體的生物生產(chǎn)力。目前,國(guó)內(nèi)外雖有關(guān)于pH脅迫對(duì)對(duì)蝦生長(zhǎng)、離子轉(zhuǎn)運(yùn)酶及免疫相關(guān)因子方面的研究,但有關(guān)中國(guó)對(duì)蝦(Fenneropenaeuschinensis)、凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeusvannamei)、日本對(duì)蝦(Marsupenaeu
2、sjaponicus)三種養(yǎng)殖對(duì)蝦在同一條件下的比較研究還未見報(bào)道。本文以生長(zhǎng)、存活、離子轉(zhuǎn)運(yùn)酶及免疫因子為指標(biāo),研究三種對(duì)蝦對(duì)水體pH變化的耐受程度。研究共分三部分:
第一部分:比較研究了中國(guó)對(duì)蝦、凡納濱對(duì)蝦和日本對(duì)蝦在對(duì)照組(pH8.2)、低pH脅迫組(pH7.2)和高pH脅迫組(pH9.2)養(yǎng)殖水體條件下的存活率、鰓離子轉(zhuǎn)運(yùn)酶(Na+-K+-ATPase)活力及血淋巴誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)、酚氧化酶(PO)
3、、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、溶菌酶(LSZ)活性及肌肉RNA/DNA比值的變化情況。結(jié)果表明:對(duì)照組三種對(duì)蝦的存活率整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間均為100%;低pH和高pH脅迫條件下,96h時(shí)日本對(duì)蝦存活率分別為96.7%和97.0%;凡納濱對(duì)蝦存活率分別為60.1%和54.6%,中國(guó)對(duì)蝦的存活率分別為58.6%和13.3%。對(duì)照組條件下,凡納濱對(duì)蝦鰓離子轉(zhuǎn)運(yùn)酶(Na+-K+-ATPase)活力最大,中國(guó)對(duì)蝦其次,日
4、本對(duì)蝦最小;在低和高pH脅迫條件下,中國(guó)對(duì)蝦鰓Na+-K+-ATPase活力變化幅度均比凡納濱對(duì)蝦大,日本對(duì)蝦的變化幅度最小,并且三種對(duì)蝦鰓Na+-K+-ATPase活力在高pH脅迫條件下變化幅度均較大。對(duì)照組條件下日本對(duì)蝦和凡納濱對(duì)蝦血清中非特異性免疫酶活性均顯著或極顯著高于中國(guó)對(duì)蝦,且日本對(duì)蝦的PO、SOD活力分別顯著、極顯著高于凡納濱對(duì)蝦;在低和高pH脅迫條件下,中國(guó)對(duì)蝦和凡納濱對(duì)蝦血清非特異性免疫酶的活力變化幅度均顯著高于日本對(duì)
5、蝦,并且中國(guó)對(duì)蝦PO、SOD、iNOS活力在高pH條件下變化幅度較大。與對(duì)照組相比,三種對(duì)蝦肌肉RNA/DNA比值隨著pH脅迫時(shí)間延長(zhǎng)而降低,說明對(duì)蝦生長(zhǎng)受到抑制。
第二部分:采用熒光定量PCR技術(shù),比較了中國(guó)對(duì)蝦、凡納濱對(duì)蝦和日本對(duì)蝦的離子轉(zhuǎn)運(yùn)酶(Na+-K+-ATPase酶)、酚氧化酶原(proPO)、錳超氧化物歧化酶(Mn-SOD)基因在不同pH脅迫條件下的表達(dá)變化。主要結(jié)果如下:(1)不同pH脅迫條件下,三種對(duì)蝦鰓
6、Na+-K+-ATPase酶基因表達(dá)均隨著脅迫時(shí)間延長(zhǎng)表現(xiàn)出先上升后下降的趨勢(shì),與對(duì)照組相比差異顯著(P<0.05),各個(gè)pH脅迫組相比,高pH脅迫組(pH8.7、9.2組)對(duì)中國(guó)對(duì)蝦Na+-K+-ATPase酶基因表達(dá)的影響較大:三種對(duì)蝦相比,中國(guó)對(duì)蝦Na+-K+-ATPase酶基因表達(dá)的變化幅度較大,凡納濱對(duì)蝦次之,日本對(duì)蝦變化幅度較小。(2)不同pH脅迫條件下,中國(guó)對(duì)蝦和凡納濱對(duì)蝦proPO基因表達(dá)隨著脅迫時(shí)間延長(zhǎng)表現(xiàn)出先上升后下
7、降的趨勢(shì),而且出現(xiàn)兩個(gè)或者三個(gè)表達(dá)高峰,與對(duì)照組相比差異顯著(P<0.05),日本對(duì)蝦proPO基因表達(dá)除pH9.2組外其余脅迫組均隨脅迫時(shí)間延長(zhǎng)先有所下降,然后又升高,達(dá)到峰值后又下降的趨勢(shì),各個(gè)pH脅迫組相比,高pH脅迫組對(duì)中國(guó)對(duì)蝦、凡納濱對(duì)蝦proPO基因表達(dá)的影響較大,pH6.7、7.2組對(duì)日本對(duì)蝦proPO基因表達(dá)的影響較大;三種對(duì)蝦相比,中國(guó)對(duì)蝦proPO基因表達(dá)變化幅度較大,凡納濱對(duì)蝦其次,日本對(duì)蝦表達(dá)變化較小。(3)不同
8、pH脅迫條件下,中國(guó)對(duì)蝦和日本對(duì)蝦Mn-SOD基因表達(dá)隨著pH脅迫延長(zhǎng)表現(xiàn)出先升高后下降的趨勢(shì),而且出現(xiàn)兩個(gè)或三個(gè)表達(dá)高峰,與對(duì)照組相比差異顯著(P<0.05),凡納濱對(duì)蝦在pH7.2、7.7脅迫組Mn-SOD基因表達(dá)表現(xiàn)出先上升后下降的趨勢(shì),而高pH脅迫組則表現(xiàn)出表達(dá)量逐漸下降的趨勢(shì),各個(gè)pH脅迫組相比,pH7.2組對(duì)中國(guó)對(duì)蝦影響較大,pH8.7、9.2組對(duì)凡納濱對(duì)蝦影響較大,pH7.7、8.7組對(duì)日本對(duì)蝦影響較大;三種對(duì)蝦之間相比,
9、日本對(duì)蝦Mn-SOD基因表達(dá)的變化幅度較大,中國(guó)對(duì)蝦次之,凡納濱對(duì)蝦最小。
第三部分:本章以中國(guó)對(duì)蝦、凡納濱對(duì)蝦和日本對(duì)蝦為實(shí)驗(yàn)材料,在解剖學(xué)的基礎(chǔ)上,分析不同pH脅迫條件下三種對(duì)蝦鰓、肝胰腺的外觀癥狀及顯微結(jié)構(gòu)的變化。結(jié)果表明pH脅迫72h后蝦鰓顏色發(fā)烏,有的發(fā)黑,鰓組織充血、腫脹,出現(xiàn)大量炎癥細(xì)胞;上皮層增厚,相互間的間隙減小,有的區(qū)域出現(xiàn)粘連,鰓絲水腫,核固縮,并且中國(guó)對(duì)蝦、日本對(duì)蝦鰓組織在pH8.7、9.2條件下比
10、pH6.7、7.2條件下?lián)p傷嚴(yán)重,凡納濱對(duì)蝦pH6.7組損傷較9.2組損傷嚴(yán)重;pH脅迫72h后肝胰腺由鮮紅變?yōu)榘导t,肝胰腺組織廣泛受損,肝小管排列紊亂,邊界變得模糊,管腔也在縮小;肝小管之間的結(jié)締組織和上皮細(xì)胞出現(xiàn)損傷,細(xì)胞大量解體、細(xì)胞核固縮或消失,并且中國(guó)對(duì)蝦、日本對(duì)蝦肝胰腺組織在pH8.7、9.2條件下比pH6.7、7.2條件下?lián)p傷嚴(yán)重,凡納濱對(duì)蝦pH6.7、7.2組比8.7、9.2組損傷嚴(yán)重。
由以上結(jié)果分析可知
11、,三種對(duì)蝦存活率相比,pH脅迫96h后中國(guó)對(duì)蝦存活率最低,凡納濱對(duì)蝦其次,日本對(duì)蝦存活率最高,并且中國(guó)對(duì)蝦pH9.2組存活率較pH7.2組低;不同pH脅迫組相比,中國(guó)對(duì)蝦pH9.2條件下鰓Na+-K+-ATPase,血淋巴PO酶活力及Na+-K+-ATPase,proPO基因表達(dá)和鰓組織損傷變化均較其他脅迫組大,這與pH9.2條件下存活率較低相一致,因此推測(cè)Na+-K+-ATPase和PO與pH脅迫較相關(guān);三種對(duì)蝦相比,中國(guó)對(duì)蝦對(duì)pH脅
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