1、【目的】：膀胱癌是臨床泌尿外科最常見的腫瘤之一，近年來，我國膀胱癌的發(fā)病率越來越呈現出上升的趨勢。膀胱癌的早期診斷和分子靶向一直是其治療的難點。越來越多的研究人員認為，腫瘤細胞和胚胎干細胞（embryonic stem cells，ESCs）可能具有相似的功能狀態(tài)，此兩種細胞中存在一些基因的共表達。LIN28A是胚胎干細胞中調節(jié)細胞時序性和細胞分化的關鍵因子之一，其長期被認為是胚胎干細胞中蛋白翻譯的促進劑。而LIN28A同時在許多腫瘤細

2、胞中表達并與人類腫瘤發(fā)生發(fā)展密切相關，其可參與到腫瘤細胞發(fā)育的各階段，包括細胞的增殖、遷移、侵襲等。近年有文獻報道LIN28A對胚胎干細胞中內質網（ER）相關蛋白的翻譯起到抑制作用。本研究組選取LIN28A以及ER相關蛋白LAMP1作為研究對象，旨在驗證LIN28A對LAMP1翻譯的影響并對比胚胎干細胞和腫瘤細胞功能狀態(tài)的異同，同時研究LIN28A在膀胱癌發(fā)生、發(fā)展中的病理生理功能，為膀胱癌早期診斷、靶向治療，研制新的基因藥物提供重要的

3、實驗依據。
　　【方法】：我們使用DNA電泳技術檢測LIN28A和LAMP1在膀胱癌細胞系（UM-UC3、5637、SW780）細胞中的表達，同時使用免疫熒光定位技術檢測它們在細胞內表達的部位。使用RNAi技術在胚胎干細胞和膀胱癌細胞中敲減LIN28A后，用qRT-PCR和western blot實驗分別在mRNA水平和蛋白水平驗證LAMP1表達情況的改變；在三種膀胱癌細胞中使用免疫共沉淀（CO-IP）實驗來驗證體外LIN28A和

4、LAMP1的結合能力；使用CCK-8實驗用來檢測LIN28A對膀胱癌細胞增殖的影響；Transwell和劃痕實驗用來驗證LIN28A對膀胱癌細胞遷移和侵襲的影響。
　　【結果】：LIN28A和LAMP1在胚胎干細胞和人類膀胱癌細胞系（UM-UC3、5637、SW780）都表達，且主要都表達于細胞胞漿內。胚胎干細胞和膀胱癌細胞中敲減LIIN28A后LAMP1 mRNA水平不發(fā)生改變，而其蛋白表達都增高。在三種膀胱癌細胞中使用 LIN

5、28A抗體都可以檢測到 LAMP1蛋白，反之亦然。轉染 LIN28A siRNA后，人類膀胱癌細胞系細胞UM-UC3、5637和SW780在24h后遷移率分別下降了52.5％(p＜0.005)、56.5%(p＜0.005)和45.3%(p＜0.005)；其在24h，48h和72h時的增殖率分別下降了7.9%(24h)、15.9%(48h)、25.0%(72h)(P＜0.05)；11.8%(24 h)、16.2%(48h)、15.9%(7

6、2h)(P＜0.05)；10.1%(24h)、15.7%(48h)、23.5%(72h)(P＜0.05)，而48h后細胞侵襲率分別下降了75.5%(p＜0.005)、53.5%(p＜0.005)和63.3%(p＜0.005)。
　　【結論】：LIN28A在胚胎干細胞和人類膀胱癌細胞系（UM-UC3、5637、SW780）細胞中具有相似的功能，其都可在不改變LAMP1 mRNA表達水平的情況下抑制LAMP1蛋白表達。LIN28A可促