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![鈣網(wǎng)蛋白對鼻咽癌細胞EMT的影響.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/10/8/2e95b987-bd25-44b3-8f5e-5363defbb75f/2e95b987-bd25-44b3-8f5e-5363defbb75f1.gif)
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文檔簡介
1、目的:本課題擬探討鈣網(wǎng)蛋白在鼻咽癌組織中的表達,并進一步研究其對鼻咽癌細胞EMT的影響。
方法:
1.采用免疫組化方法檢測鈣網(wǎng)蛋白(Calreticulin)在鼻咽癌組織中的表達情況,并分析其表達的臨床意義;
2.構(gòu)建pcDNA3.1(+)/Calreticulin真核表達載體,采用陽離子脂質(zhì)體瞬時轉(zhuǎn)染鼻咽癌CNE2細胞(以pcDNA3.1(+)載體為對照),通過Western blot檢測CNE2細胞中
2、Calreticulin的表達;
3.光鏡觀察Calreticulin高表達對CNE2細胞形態(tài)的影響,利用遷移侵襲實驗檢測Calreticulin高表達對CNE2細胞遷移侵襲能力的影響;
4.選用Western blot檢測轉(zhuǎn)染后鼻咽癌CNE2細胞中EMT相關(guān)蛋白Vimentin、MMP-9、TGF-β以及E-cad的表達情況。
結(jié)果:
1.Calreticulin在鼻咽癌組織中的陽性表達率為82
3、.69%(43/52),鼻咽部良性病變組織為19.29%(11/57),Calreticulin在鼻咽癌組織中表達顯著增高(P<0.05);Calreticulin的表達率與鼻咽癌分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)(r=0.457、r=0.382,P<0.05)。
2.轉(zhuǎn)染后鼻咽癌CNE2細胞中Calreticulin表達明顯升高,CNE2細胞的形態(tài)由扁平、鵝卵石樣上皮形態(tài),逐漸演變?yōu)殚L梭形、纖維細胞樣形態(tài),呈現(xiàn)典型的EMT現(xiàn)象,且CN
4、E2細胞的遷移侵襲能力較對照組明顯增強(P<0.05)。
3.Western blot檢測結(jié)果顯示,Calreticulin在CNE2細胞中表達升高后,細胞中E-cad表達顯著降低(P<0.05)。而Vimentin、MMP-9、TGF-β三種蛋白的表達則顯著升高(P<0.05)。結(jié)果提示,Calreticulin表達升高能夠促進鼻咽癌CNE2細胞發(fā)生EMT,增強鼻咽癌CNE2細胞的遷移及侵襲能力。
結(jié)論:Calre
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