1、布魯氏菌病（Brucellosis）是當今世界上廣為流行的人畜共患的慢性傳染性疾病，在我國被列為二類傳染病。該病由革蘭氏陰性細菌布魯氏菌屬（Brucella）的病原菌感染而引起，人感染后呈現波浪熱以及關節(jié)痛和睪丸炎等臨床癥狀，動物感染后會造成流產、不孕不育和組織壞死等嚴重的后果。近十多年來，牲畜感染布魯氏菌病的數量不斷增加，我國感染布魯氏菌病的人數持續(xù)上升，布魯氏菌病已經成為阻礙牧區(qū)經濟發(fā)展的重要因素，嚴重威脅了人類健康。目前，在世界范

2、圍內，布魯氏菌病還不能被完全治愈，所以，關于布魯氏菌及布魯氏菌病的研究和防治工作尤為重要，對布魯氏菌病最主要的防控措施是接種疫苗。
　　布魯氏菌外膜蛋白（Omp）是可以引起保護性免疫反應的一種細菌表面蛋白，一直被視為關于布魯氏菌研究的重點；細胞質結合蛋白被認為與布魯氏菌的致病性相關，可誘導機體產生強烈的免疫反應。本文以布魯氏菌細胞質結合蛋白基因P39和抗原表位基因（omp10、omp19、omp22、omp25、omp28）為研究

3、對象，以豬型布魯氏菌疫苗S2弱毒活疫苗菌株的全基因組DNA為模板，設計引物克隆目的基因，將得到的目的基因插入質粒載體中，成功構建重組質粒pET-28a-omp10、pET-28a-omp19、pGEX-4T-1-omp22、pET-28a-omp25、pET-28a-omp28和pGEX-4T-1-p39，經PCR檢測和測序鑒定正確后，導入到表達菌株中，IPTG誘導表達蛋白，重組蛋白經聚丙烯酰胺變性凝膠電泳（SDS-PAGE）檢測分析。

4、實驗結果表明，重組蛋白可以成功表達， Omp10、Omp19、Omp22、Omp25、Omp28、P39蛋白的分子量分別為38.5 kD、17.6 kD、47 kD、53.5 kD、52.5 kD、39 kD，與預期一致。將純化后的蛋白與弗氏佐劑混合后免疫家兔，取血清后進行免疫血清的Western blot檢測，結果顯示，Omp22、P39蛋白刺激機體產生了相應的抗體，具有良好的免疫原性。本試驗為進一步篩選的確有效的布魯氏菌亞單位疫苗提