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![野生及人工粉被蟲草代謝組差異及活性物質研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/11/8/97dfe7fd-2143-4dfa-99ea-2d038a52c7ae/97dfe7fd-2143-4dfa-99ea-2d038a52c7ae1.gif)
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文檔簡介
1、蟲草屬于真菌類,具有很好的藥用價值和實際應用價值。本實驗以粉被蟲草(Cordyceps pruinosa Petch)為研究對象,分別對人工培養(yǎng)粉被蟲草孢梗束和菌絲體(菌株RCEF4730)、人工粉被蟲草孢梗束和野生孢梗束進行代謝組分析比較,通過比較發(fā)現(xiàn)他們的差異代謝物,并成功分離和鑒定了其中的兩種差異標記物的分子結構。
本實驗利用高效液相-高分辨質譜聯(lián)用技術(LC-DAD-HRMS),通過代謝組學的方法分析粉被蟲草孢梗束與菌
2、絲體的代謝差異,以及孢梗束在人工培養(yǎng)條件下和野外生長條件下的代謝差異。利用PCA(主成分分析)和OPLS-DA(偏最小二乘法-判別分析)的方法處理數(shù)據(jù),結果顯示:人工孢梗束與菌絲體之間、人工培養(yǎng)的孢梗束和野外條件下產生的孢梗束間均存在顯著的代謝組差異。人工孢梗束與菌絲體的主要差異代謝物有adenine、tabtoxin biosynthesis intermediate6、antibiotic OS1804、carbobenzoxy g
3、lycyl glycyl-L-phenylalanine、N6-(2-hydroxyethyl)adenosine、2,3,5,6,10,14,16-grayanotoxanehepto、hydroxy palmitic acid、antibiotic FD549、curcumin、8-amino-4-methylaconitane-1,3,6,13,14,15,16,18-octol、aphidicolin、PE(18∶0/0∶0)、
4、4-methylaconitane-1,6,8,13,14,16,18-heptol、PC(16∶0/0∶0)、bisparthenolidine、roridin H、PS(21∶0/0∶0)、rhizoxin D等;粉被蟲草人工孢梗束和野生型孢梗束的主要差異代謝物有pseudopelletierine、noformicin、tremetone、shogaols、hydroxy palmitic acid、hydroxy-octadec
5、anoic acid、2-linoleoyl glycerol、dodecanoic acid、jacoline、hydroxy-tetracosanoic acid、4-methylumbelliferyl myo-inositol-1-phosphate、riccardin C、metenaticinC、 PI(16∶0/0∶0)、daunomycin、butanoic acid、nonenoic acid、betaine、urac
6、i、4-O-glucopyranosyl-D-gluconic acid、3'-O-glucopyranoside等。
其中,具有很強的抗紫外輻射、抗血小板凝結和鎮(zhèn)痛等作用的N6-(2-羥乙基)腺苷在人工粉被蟲草孢梗束中的含量高于菌絲體,并且和野生粉被蟲草含量沒有太大差別;色素分子C30H18O13和C30H18O12等在人工孢梗束中的含量均高于菌絲體和其野生孢梗束,說明,在N6-(2-羥乙基)腺苷和天然色素等成分的利用方面,
7、人工培養(yǎng)的粉被蟲草具有較高的利用價值。
通過HPLC-DAD-HRMS分析發(fā)現(xiàn),菌株RCEF4730孢梗束和菌絲體的甲醇提取物中含有多種天然色素,主要含有紅色和黃色兩種色素。人工粉被蟲草孢梗束和菌絲體的甲醇提取物還含有一類紫色色素P-2,其分子式是C30H18O14。然后根據(jù)此化合物的分子式和紫外吸收波長,在Chapman&Hall天然數(shù)據(jù)庫上查詢,初步認為該化合物是一種新的化合物。
利用高相液相色譜儀分離得到三種化
8、合物P-1、P-3、P-4的純品,其中P-3、P-4均為羥基蒽醌類色素,P-3呈紅色,P-4呈黃色。經(jīng)LC-HRMS和NMR數(shù)據(jù)解析得知,化合物P-1的分子式為C16H23N3O13,數(shù)據(jù)庫查詢發(fā)現(xiàn)這是一個新分子式,因此該化合物為新化合物,具體結構尚在鑒定中;化合物P-3的分子式為C30H18O13,其紫外特征吸收峰分別是225nm、266nm、297nm、503nm,系統(tǒng)學名為:2,2',4,4',5,5',8-heptahydrox
9、y-7,7'-dimethoxy-1,1'-bianthraquinon;化合物P-4的分子式為C30H18O12,其紫外特征吸收峰分別是225nm、266nm、297nm、467nm,系統(tǒng)學名為:2,2',4,4',5,5'-hexahydroxy-7,7'-dimethoxy-1,1'-bianthraquinone。化合物P-3具有清除自由基活性,當P-3的濃度為0.4g/L時,對0.4g/L的DPPH自由基清除率達到了48.18
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