1、第一章：ISSR分子標記技術及其應用 介紹簡單重復序列間擴增(inter-simple sequence repeat，ISSR)分子標記的原理、方法、特點及其在遺傳研究中的應用。ISSR標記技術可以快速、高效、靈敏地檢測基因組遺傳信息，在動、植物遺傳研究中具有廣泛的應用前景。 第二章：絨螯蟹ISSR-PCR反應體系與反應條件的優(yōu)化 以絨螯蟹基因組DNA為材料，分析了DNA濃度、Mg<'2+>濃度、引物濃度、d

2、NTP濃度，以及引物的退火溫度對ISSR-PCR擴增結果的影響，篩選出了擴增穩(wěn)定、條帶清晰、多態(tài)性豐富的8條ISSR引物，建立了絨螯蟹ISSR-PCR的最佳反應體系及PCR擴增條件，為利用ISSR標記技術開展絨螯蟹種群遺傳多樣性分析等工作奠定了基礎。 第三章用ISSR標記檢測中國大陸7水系絨螯蟹種群的遺傳多樣性 用ISSR分子標記探討了中國大陸7水系絨螯蟹(Mitten crab)的遺傳多樣性及其遺傳分化。在30條ISS

3、R引物中篩選了10條擴增穩(wěn)定、條帶清晰、多態(tài)性高的引物。共獲得92條清晰條帶，其中61條具有多態(tài)性，多態(tài)條帶比(PPB)66.3％。各水系絨螯蟹的多態(tài)帶百分比在6.52％～58.70％之間，平均為32.14％。長江水系和湛江青年河水系絨螯蟹的遺傳多樣性較高，而閩江和甌江水系表現出的遺傳多樣性較低。7水系絨螯蟹種群之間表現出較高水平的遺傳分化(Gst=0.5802)，南方3水系的絨螯蟹與北方4水系絨螯蟹之間的遺傳距離明顯大于南北方水系內部

4、的遺傳距離。在UPMGA聚類樹上，南方3水系與北方4水系分化成兩大分支，對應于中國大陸南方水系的合浦絨螯蟹和北方水系的中華絨螯蟹。來自甌江、遼河和鴨綠江3水系的個體(除2個體外)分別獨立聚成3個支系(OJ、LH、YLJ支)，且這3支系又分別嵌套在長江水系絨螯蟹的支系之內，表明它們與長江水系種群有著密切的親緣關系，據此推測，這3個種群可能都來源于長江水系。此外，本文基于ISSR標記技術對混入南方水系的2中華亞種單元型的分析，提出了中華絨螯