溶膠-凝膠法固定化脫氫酶制備及其應(yīng)用研究.pdf_第1頁(yè)
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1、該論文采用改進(jìn)的溶膠-凝膠法固化脫氫酶(醇脫氫酶、醛脫氫酶和酸脫氫酶),并對(duì)制得的生物催化劑性質(zhì)及其應(yīng)用進(jìn)行研究.首先采用溶膠-凝膠法分別對(duì)三種脫氫酶進(jìn)行包埋,并比較了三種游離醇和固定化酶的動(dòng)力學(xué).實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,三種固定化酶酶促反應(yīng)與游離酶酶促反應(yīng)都符合Daziel基于Michaelis-Menten方程提出的雙底物(BiBi)酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)模型,三種酶的催化活性和選擇性都能保持.固定化后,酸脫氫酶(F<,ate>DH)、醛脫氫酶(F<

2、,ald>DH)和醇脫氫酶(ADH)的酶活分別為游離酶的50-70﹪、55-65﹪、40-50﹪.三種酶促反應(yīng)的米氏常數(shù)也相應(yīng)增大,親合力降低.在凝膠過程的不同階段分別加入酸和堿兩種催化劑,可以加快凝膠化速率,并且改善凝膠材料的性質(zhì).通過吸附檢測(cè),含酶凝膠的孔徑分布主要集中在3.2-3.5nm之間;通過透射電鏡觀測(cè),酶在凝膠中分布均勻;利用紫外-可見分光光度計(jì)檢測(cè),酶固定化后空間結(jié)構(gòu)能夠保持完好.同時(shí)通過理論方法擬合了醇脫氫酶酶促反應(yīng)動(dòng)

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