1、目的：明確經(jīng)甘草次酸修飾的半乳糖化殼聚糖納米顆粒（GCGA NPs）在生物體內(nèi)的分布及其對肝癌（HCC）細胞的靶向效率，進一步評估該納米顆粒的細胞毒性和生物相容性。
　　方法：遵循先前報道的兩步酰胺化反應合成GACS NPs和GCGA NPs，并通過化學反應修飾異硫氰酸熒光素（FITC）。采用場發(fā)射掃描電子顯微鏡（FE-SEM）來觀測納米顆粒的形態(tài)和大小，用Zetasizer3000HS儀器系統(tǒng)測量其粒徑。通過設置體外細胞攝取實驗

2、，在共聚焦激光掃描顯微鏡（CLSM）下觀察比較三種納米顆粒（GCGA、GACS、CS NPs）對HepG2細胞的靶向能力以及GCGA NPs對HepG2細胞和人正常肝細胞LO2的親和力。以CCK-8法來測試不同濃度的GCGA NPs對HepG2的細胞毒性。用體外溶血試驗評估納米顆粒的血液相容性。采用肝臟隧道嵌入法構(gòu)建H22細胞小鼠原位肝癌模型，用FITC標記的熒光納米顆粒溶液經(jīng)尾靜脈注射小鼠，以追蹤不同時間點該納米載體在生物體內(nèi)的分布，

3、進一步驗證其對高表達甘草次酸（GA）和乳糖醛酸（LA）受體的肝癌組織的高靶向性。通過檢測經(jīng)GCGA NPs處理過的SD大鼠的體重、血常規(guī)和血生化指標，并鏡下觀察其主要器官的HE染色標本，來評估該納米顆粒的生物相容性。
　　結(jié)果：參考已報道的合成方法成功制備出GCGA、GACS、CS NPs，并標記了FITC。FE-SEM圖片顯示三者均呈球形，單分散性，大小均一，平均粒徑約為60nm。動態(tài)光散射（DLS）檢測其平均粒徑分別為93.8

4、nm、90.3nm和94.0nm。在相同條件下，來自GCGA NPs共聚焦圖片熒光強度比其他兩種納米顆粒更強，并且HepG2細胞內(nèi)的綠色熒光相較于缺乏靶向受體的LO2細胞也有顯著的增強。細胞毒性實驗表明GCGA NPs在濃度低于50ug/mL時對HepG2的無明顯的細胞毒性。這種納米顆粒即使在最高濃度（300ug/mL）下孵育紅細胞3h也沒有呈現(xiàn)出明顯的溶血現(xiàn)象，經(jīng)t檢驗分析可知上清液的光密度值（OD值）與對照組比較無統(tǒng)計學差異（P>0