1、研究背景
　　 組蛋白去乙?；福℉istone Deacetylases，HDACs）抑制劑是一類新型抗腫瘤藥物，對多種腫瘤細胞中具有抑制增殖、誘導凋亡和分化的作用。目前，全球有超過100個關于HDAC抑制劑的臨床試驗正在進行，并已取得令人振奮的結(jié)果，顯示了該藥良好的臨床應用前景。2006年，美國食品與藥品管理局（FDA）正式批準第一個HDAC抑制劑——Zolinza膠囊（Vorinostat）上市，用于治療皮膚T細胞淋巴瘤。

2、然而，關于HDAC抑制劑作用機制的研究還相對落后，目前，國內(nèi)外對HDAC抑制劑特異性抗腫瘤效應的作用靶點的認識仍不十分明確，近年來，雖然有一些研究報道了HDAC抑制劑相關的效應分子，但并不能建立相關靶點與HDAC抑制劑選擇性殺滅腫瘤細胞效應間的必然邏輯聯(lián)系。因此，系統(tǒng)的篩選HDAC抑制劑的作用靶點，不僅有助于闡明HDAC抑制劑選擇性抗腫瘤效應的機制，還對進一步發(fā)展腫瘤靶向性藥物的研究具有重要意義。
　　 目的
　　 通過

3、構建SMART（Suppression of Mortality by Antisense Rescue Technique）文庫，以功能效應為基礎篩選HDAC抑制劑的作用靶點，闡明HDAC抑制劑選擇性誘導腫瘤細胞凋亡的新機制。
　　 方法
　　 建立Trichostatin A選擇性誘導腫瘤細胞凋亡模型，構建MCF-7細胞經(jīng)HDAC抑制劑——Trichostatin A誘導表達反義cDNA文庫，篩選凋亡效應基因，結(jié)合生

4、物信息學分析，確定相應的靶點進行深入機制研究。
　　 結(jié)果
　　 成功構建了Trichostatin A選擇性誘導腫瘤細胞反義cDNA文庫，經(jīng)過兩輪嚴格藥物篩選后，共獲得了24個候選靶基因。通過對Ubiquitin B基因進行深入機制研究發(fā)現(xiàn)：Ubiquitin B在腫瘤細胞中可以被Trichostatin A選擇性誘導表達升高，Trichostatin A可以引起腫瘤細胞線粒體膜上BCL-2家族抗凋亡蛋白BCL-2和M

5、CL-1的泛素化降解，改變線粒體膜電位，啟動細胞線粒體凋亡途徑，最終導致腫瘤細胞凋亡；反義封閉Ubiquitin B可以抵抗Trichostatin A的凋亡誘導作用。另一類HDAC抑制劑——Apicidine，也與Trichostatin A具有相同的作用；此外，Trichostatin A還可以引起白血病細胞K562中融合蛋白BCR/ABL發(fā)生泛素化降解。
　　 結(jié)論
　　 SMART技術作為一種基于功能效應的高通量