1、目的：
　　探討在炎癥狀態(tài)下胰島素樣生長(zhǎng)因子（insulin like growth factor-1，IGF-1）對(duì)血管平滑肌細(xì)胞增殖和凋亡的影響。
　　方法：
　　1.取雄性SD大鼠，斷頸后分離主動(dòng)脈，超凈臺(tái)內(nèi)去除內(nèi)膜和外膜，按組織貼塊法+酶消化法獲取原代血管平滑肌細(xì)胞并傳代，實(shí)驗(yàn)取用第4-8代細(xì)胞，α-肌動(dòng)蛋白陽(yáng)性表達(dá)的細(xì)胞鑒定為平滑肌細(xì)胞。
　　2.不同濃度的脂多糖（lipopolysaccharide，

2、LPS）誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞制備炎癥模型，ELISA法檢測(cè)各組上清液中IL-6的水平，與對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義為造模成功，即條件培養(yǎng)基（conditioned medium，CM），未加LPS誘導(dǎo)組為對(duì)照組即非條件培養(yǎng)基（nonconditioned medium，nCM）。
　　3.平滑肌細(xì)胞分別與nCM、CM、CM+IGF-160ng/ml、CM+IGF-190ng/ml、CM+IGF-1120ng/ml共培養(yǎng)，用MT

3、T法檢測(cè)各組OD值，以O(shè)D值反應(yīng)各組VSMC的數(shù)量，用流式法檢測(cè)各組平滑肌細(xì)胞的凋亡率。
　　4.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：以SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，兩組間比較用t檢驗(yàn)，多組間比較用方差分析，P＜0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)果：
　　1.使用組織貼塊法+酶消化法可成功獲取實(shí)驗(yàn)所需血管平滑肌細(xì)胞。
　　2.一定濃度的LPS誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞后上清液中IL-6的表達(dá)量顯著升高。RAW264

4、.7細(xì)胞分別在LPS0ng/ml，10ng/ml，100ng/ml，1ug/ml，10ug/ml濃度刺激下各組上清液中IL-6的濃度分別是（6.75±0.12）pg/ml；（7.82±1.53）pg/ml；（44.09±1.58）pg/ml；（155.71±23.93）pg/ml；（436.59±3.15）pg/ml，與對(duì)照組相比，10ng/ml組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.916）；后三組與對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.009,

5、P=0.000,P=0.000）。
　　3.CM組能抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖，加入一定濃度的IGF-1可逆轉(zhuǎn)其對(duì)血管平滑肌細(xì)胞增殖的抑制。VSMC在五組不同干預(yù)下各組OD值分別是（0.53±0.07）、（0.26±0.06）、（0.30±0.10）、（0.62±0.09）、（0.55±0.05）。與nCM組相比， CM組OD值明顯降低(p=0.000），兩組間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與CM組相比，CM+IGF-160ng/ml組、CM+I

6、GF-190ng/ml組、CM+IGF-1120ng/ml組 OD值升高（p=0.993，p=0.001，p=0.000），后兩組與CM組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，以90ng/ml組效果最好。
　　4.CM組可促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞凋亡，加入一定濃度的IGF-1可逆轉(zhuǎn)其對(duì)血管平滑肌細(xì)胞的促凋亡作用。五組干預(yù)下VSMC凋亡率分別是（4.89±0.09）％；（10.86±0.15）％；（9.64±0．65）％；（3.85±0.51）％；（4.82

7、±0.08）％。與nCM組相比，CM組凋亡率明顯增加（p=0.000），兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與CM組相比，CM+IGF-160ng/ml組、CM+IGF-190ng/ml組、CM+IGF-1120ng/ml組凋亡率顯著降低（p=0.045，p=0.000，p=0.000），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，以90ng/ml組效果最好。
　　結(jié)論：
　　LPS可誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞極化為M1型巨噬細(xì)胞。M1型巨噬細(xì)胞所致的炎癥狀態(tài)可促