1、尖音庫蚊復合組Culexpipiens Complex是全球性分布的媒介蚊蟲復合組。在我國,該復合組包括尖音庫蚊指名亞種、致倦庫蚊、淡色庫蚊和騷擾庫蚊。我國已知前三者的分布情況,其中新疆地區(qū)是典型的尖音庫蚊的孳生地,北方地區(qū)為淡色庫蚊,南方地區(qū)為致倦庫蚊,并在北京、沈陽、上海地區(qū)發(fā)現(xiàn)騷擾庫蚊。
　　該復合組種類遍布于全國,而且是全球重要的疾病傳播媒介,在醫(yī)學上具有重要研究價值,其中尖音庫蚊亞種的淡色庫蚊和致倦庫蚊是我國斑氏絲蟲病的

2、主要傳播媒介。該復合組還是我國廣大城鄉(xiāng)的優(yōu)勢蚊蟲,其中淡色庫蚊和致倦庫蚊分別是我國北方和南方常見蚊種,是城鎮(zhèn)入室吸血騷擾的主要蚊種。
　　該復合組的分類是蚊蟲分類學研究中公認的世界性難題。國內(nèi)外學者對該復合組分類地位、鑒別形態(tài)和地理區(qū)劃做了不少研究,該復合組的各亞種形態(tài)頗為相似,從外形上很難鑒別,其雄蚊陽莖側(cè)板中葉的形態(tài)特征是種下分類的重要依據(jù),且雄蚊陽莖DV/D值是該復合組的重要形態(tài)學鑒別特征。然而對于雌性成蚊,仍然,沒有可鑒別

3、的形態(tài)特征,同時該復合組成員之間的進化和親緣關系也還沒有深入的研究。
　　隨著分子生物學技術,尤其是PCR技術和核酸自動測序技術的迅速發(fā)展,成熟的基因擴增及測序技術,結合比較發(fā)達的網(wǎng)絡與信息技術,給我們提供了以DNA為基礎的分子系統(tǒng)分類學的發(fā)展。較傳統(tǒng)的形態(tài)分類學而言,分子系統(tǒng)分類學可以利用小塊生物體組織進行鑒別,能夠在生物的不同生長階段鑒別物種;并能夠?qū)鹘y(tǒng)分類系統(tǒng)進行驗證,彌補其不足?，F(xiàn)已被廣泛用于研究昆蟲系統(tǒng)發(fā)育、行為進化、

4、種群遺傳變異和分化,以及區(qū)分近緣種的鑒別,種下分類單元的鑒定等方面。多種分子標記的出現(xiàn),為尖音庫蚊復合組蚊蟲在系統(tǒng)分類學、種群遺傳學、種群生態(tài)學等方面的研究提供了新的思路和方法,從而能更好地闡明媒介蚊蟲和疾病傳播的關系,為蚊媒和蚊媒病的防治提供重要的參考。
　　本研究依據(jù)外部形態(tài)分類鑒定及前人工作的基礎上,以我國尖音庫蚊復合組中的四亞種為研究對象,綜合多個分子標記,利用分子生物學技術對其分子標記的基因序列進行研究,通過測定基因序列

5、,對每個分子標記進行詳細的分析,構建了該復合組在分子水平的系統(tǒng)發(fā)育關系。
　　研究結果如下:
　　1.15個尖音庫蚊復合組種群中COⅠ和COⅡ基因序列獲得的長度為633bp和626bp,兩者均表現(xiàn)出A+T含量高于C+G含量的趨向性和氨基酸的偏向性,它們的各序列之間的差異度與遺傳距離均呈線性關系,且轉(zhuǎn)換大于顛換,堿基替換未達到飽和,說明尖音庫蚊復合組種間存在較大的進化潛能。
　　2.15個尖音庫蚊復合組種群中COⅠ和CO

6、Ⅱ基因序列遺傳距離范圍均在0~0.013之間,說明該復合組變異性較低,遺傳相似性較高。聚類分析結果表明COⅠ和COⅡ基因在尖音庫蚊復合組種內(nèi)十分保守,不適合在分子系統(tǒng)學研究中用于作亞種階元的分子特征指標,從另一個角度表明,由于COⅠ和COⅡ基因序列較為相似,因此可以看出尖音庫蚊、淡色庫蚊、致倦庫蚊和騷擾庫蚊仍屬于同一個種。
　　3.30個尖音庫蚊復合組種群中AChE2基因序列獲得的長度為925bp,其也表現(xiàn)出A+T含量趨向性和氨基

7、酸的偏向性,它們的各序列之間的差異度與遺傳距離也呈線性關系,且轉(zhuǎn)換大于顛換,堿基替換未達到飽和。
　　4.30個尖音庫蚊復合組種群中AChE2基因序列遺傳距離范圍均在0~1.292之間,說明該復合組變異性較大。聚類分析結果表明AChE2基因序列在尖音庫蚊復合組蚊蟲亞種階元分類上具有重疊交叉現(xiàn)象,不能與傳統(tǒng)形態(tài)學分類統(tǒng)一起來,說明就AChE2基因來說,我國尖音庫蚊復合組蚊蟲分化還沒有達到可以通過該序列區(qū)分的程度。
　　5.34

8、個地區(qū)的尖音庫蚊復合組蚊蟲除新疆霍城的尖音庫蚊外均有wolbachia感染,感染率在24％~100%。說明我國尖音庫蚊復合組地理種群內(nèi)wolbachia感染現(xiàn)象十分普遍,且其分布不均勻,感染情況呈現(xiàn)多樣性。其中32個地區(qū)中測得的wsp基因序列差異較小,經(jīng)多序列比對排齊后完全一致。說明我國尖音庫蚊復合組親緣關系很近,同源性較高。
　　6.22個地理采集點經(jīng)雄蚊陽莖形態(tài)、DV/D值與蚊蟲生存環(huán)境及自育性綜合分析,認為黑龍江黑瞎子島、甘

9、肅嘉峪關、甘肅張掖、甘肅民勤、和甘肅武威的尖音庫蚊復合組蚊蟲為尖音庫蚊,并確定在內(nèi)蒙古滿洲里發(fā)現(xiàn)騷擾庫蚊新紀錄。
　　7.22個地區(qū)雄蚊陽莖DV/D值與緯度之間呈強負相關,運用其回歸方程驗證了30°左右為我國淡色庫蚊與致倦庫蚊地理分布的理論分界線,說明尖音庫蚊復合組雄蚊陽莖DV/D值隨地理緯度不同而變化。
　　8.25個尖音庫蚊復合組地理種群在9個微衛(wèi)星位點中每個位點的平均等位基因數(shù)為5.92,平均多態(tài)信息含量為0.697,

10、平均香農(nóng)多樣性指數(shù)為1.236,平均觀察雜合度為0.471,說明我國尖音庫蚊復合組種群內(nèi)的遺傳變異比較豐富,為高度多態(tài)性,屬高度雜合群體,有較大的遺傳潛力,能反映種間的遺傳多樣性信息。
　　9.9個微衛(wèi)星位點在25個尖音庫蚊復合組種群進行哈迪溫伯格平衡檢驗,除Cx2、Cp3和Cx7位點外均偏離哈溫平衡;它們的平均固定指數(shù)為0.224,平均遺傳分化系數(shù)為0.228,說明群體間并非隨機交配,存在高度的遺傳分化?；蛄鞯钠骄禐?.00