葡萄屬葉綠體基因組分析及其系統(tǒng)發(fā)育研究.pdf_第1頁
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1、葡萄科植物物種豐富,分布廣泛,且具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和觀賞價(jià)值。近年來,對(duì)葡萄科植物的研究從未停歇。目前,絕大多數(shù)被子植物葉綠體全基因組序列已經(jīng)測(cè)定完成。將不同物種葉綠體基因組全序列進(jìn)行比較以及對(duì)4個(gè)區(qū)域邊界的差異分析,有助于了解葉綠體基因組序列差異,理解物種之間的進(jìn)化過程。葉綠體基因組序列因具有較強(qiáng)的保守性和較低的堿基替換率等特點(diǎn),使其成為系統(tǒng)發(fā)育研究較為理想的數(shù)據(jù)。本研究利用Illumina二代測(cè)序技術(shù)對(duì)葡萄屬11個(gè)種葉綠體基因組進(jìn)行

2、測(cè)序,對(duì)包括蛇葡萄、垂盆草和煙草在內(nèi)的16個(gè)葉綠體基因組進(jìn)行比較分析,并以葉綠體基因組79個(gè)共有的蛋白編碼基因?qū)ζ咸芽?9個(gè)種進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育研究,揭示葡萄科各屬種之間的進(jìn)化關(guān)系。主要研究結(jié)果如下:
  1.測(cè)定和注釋了葡萄屬11個(gè)種葉綠體全基因組序列,得到11條完整的葉綠體基因組。葡萄屬葉綠體基因組十分保守,大小為160935-160982bp;具有典型的四分體結(jié)構(gòu),包含一個(gè)大單拷貝區(qū)(LSC,89159-89193bp),一個(gè)小單

3、拷貝區(qū)(SSC,19045-19073bp)和一對(duì)反向重復(fù)區(qū)(IRs,26250-26373bp);含有113個(gè)不同的基因(79個(gè)蛋白編碼基因,30個(gè)tRNA和4個(gè)rRNA),此外,注釋了兩個(gè)特殊的沒有編碼蛋白功能的基因:ycf15和ycf68,均位于反向重復(fù)區(qū);11個(gè)種葉綠體基因組GC含量非常相似,約為37.4%;密碼子偏好A和T,尤其是密碼子第二位和第三位,高達(dá)61.61%和69.74%;對(duì)重復(fù)序列和簡(jiǎn)單重復(fù)序列(SSR)進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)

4、分析,為葡萄屬植物的相關(guān)研究提供了基礎(chǔ)。
  2.16個(gè)葉綠體基因組全序列比對(duì)結(jié)果表明:IR區(qū)域比LSC/SSC區(qū)域更加保守;葡萄屬內(nèi)葉綠體基因組非常保守,葡萄科蛇葡萄屬植物與葡萄屬植物也具有較強(qiáng)的共線性,而與其他被子植物(垂盆草和煙草)具有較大的差異。葡萄屬13個(gè)種之間的遺傳距離反映了物種親緣關(guān)系的遠(yuǎn)近;分別對(duì)編碼區(qū)和非編碼區(qū)的核苷酸多態(tài)性(Pi)進(jìn)行分析,共檢測(cè)到10個(gè)變異度較高的區(qū)域(psbZ-trnG(UCC),csA-n

5、dhD,atpF-atpH,accD-psaI,ndhF-rpl32,rps15-ycf1,trnK(UUU)-rps16,rpl32,rpl33,atp),其中3個(gè)位于編碼區(qū),其余均位于非編碼區(qū)。四個(gè)區(qū)域邊界的比對(duì)結(jié)果顯示,基因rps19、ndhF、ycf1、φrps19和φycf1等的大小和分布存在不同程度的差異,這些差異反映了葉綠體基因組的進(jìn)化過程。
  3.本研究基于葉綠體基因組79個(gè)共有的蛋白編碼基因?qū)ζ咸芽?9個(gè)種進(jìn)行

6、系統(tǒng)發(fā)育研究,以更加全面的數(shù)據(jù)確定和驗(yàn)證葡萄科各屬種之間的系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系。兩種不同的分析方法(ML和MP)得到了相同的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu),將葡萄科植物分為5個(gè)主要的分支(Vitis-Ampelocissus clade,Parthenocissus-Yua clade,core Cissus clade,Cayratia-Cyphostemma-Tetrastigma clade,Ampelopsis-Rhoicissus clade),且每個(gè)分支

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