鐵對銅綠假單胞菌PAO1種群穩(wěn)定影響及機(jī)制探究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、銅綠假單胞菌是常見的條件致病菌,其致病因子的表達(dá)受群體感應(yīng)所調(diào)控。實(shí)驗(yàn)室已有研究顯示,環(huán)境因子銨會(huì)影響群體感應(yīng)穩(wěn)定、造成種群崩潰、防止致病感染。鐵作為重要的環(huán)境因子,與群體感應(yīng)PQS系統(tǒng)密切相關(guān),但是至今未見鐵對群體感應(yīng)穩(wěn)定的影響。基于此,本論文以銅綠假單胞菌Pseudomonas aeruginosa PAO1為試驗(yàn)菌株,研究鐵對其群體感應(yīng)穩(wěn)定的影響,并對鐵致群體感應(yīng)穩(wěn)定影響的分子機(jī)制進(jìn)行初探。所得主要結(jié)果如下:
  (1)鐵可

2、以影響銅綠假單胞菌PAO1種群穩(wěn)定。在設(shè)定的鐵鹽濃度下,銅綠假單胞菌PAO1的生長沒有顯著性差異;競爭體系中,0-12.5μM鐵濃度下沒有組別發(fā)生崩潰,25-100μM鐵濃度下崩潰組別比例為40%,200μM鐵濃度下崩潰組別比例為60%,鐵濃度越高種群越不穩(wěn)定;長期進(jìn)化體系中,外加鐵亦可影響銅綠假單胞菌種群穩(wěn)定,在25μM鐵濃度下銅綠假單胞菌崩潰概率為20%,長期進(jìn)化體系中鐵對種群的干擾要較競爭體系小,其機(jī)理值得進(jìn)一步探究。
  

3、(2)鐵對銅綠假單胞菌PAO1不同群體感應(yīng)系統(tǒng)影響存在差異。鐵對群體感應(yīng)信號分泌lasⅠ和rhlⅠ的影響不大,但對pqsH有抑制作用,相較于不加鐵環(huán)境,加鐵環(huán)境pqsH表達(dá)僅為不加鐵環(huán)境的68.01%。鐵不會(huì)影響LasR受體活性,但可顯著抑制RhlR和PqsR受體的活性,相較于不加鐵環(huán)境,加鐵環(huán)境rhlR和pqsR表達(dá)相近,僅為不加鐵環(huán)境的40%。加鐵可顯著抑制蛋白酶、綠膿素、鼠李糖脂分泌,相較于不加鐵環(huán)境,加鐵環(huán)境中胞外物的分泌依次為

4、不加鐵環(huán)境的66.7-91.7%,89.3-93.8%,58.3-74.3%。三個(gè)群體感應(yīng)系統(tǒng)中,鐵對RhlIR和PQS的影響較大,對LasIR系統(tǒng)影響較小,但是鐵顯著抑制公共物質(zhì)的分泌可能是鐵致種群不穩(wěn)定的主要因素之一。
  (3)蛋白酶對群體感應(yīng)穩(wěn)定的影響較為顯著;鐵元素通過影響mexT和ampR來影響蛋白酶的表達(dá)、進(jìn)而對銅綠假單胞菌種群穩(wěn)定產(chǎn)生重要影響;較之蛋白質(zhì)酶,鼠李糖脂對種群穩(wěn)定影響較小,鐵元素主要通過影響rhIR對膿

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