1、胚胎干細胞(embryonic stem cells，ES cells)是來源子著床前囊胚內(nèi)細胞團(inner cell mass， ICM)的具有自我更新能力和分化全能性的細胞。由于ES細胞具有在一定條件下分化成三個胚層來源的各種細胞的潛能，所以蘊含著巨大的基礎(chǔ)研究價值和廣闊的臨床應(yīng)用前景。已有的研究表明，ES細胞的特性主要受到細胞外信號和細胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子的共同調(diào)控。過去大量的研究主要圍統(tǒng)經(jīng)典的轉(zhuǎn)錄因子維持ES細胞特性的分子機制展開。因

2、而，目前對于經(jīng)典轉(zhuǎn)錄因子之外的調(diào)控因子及通路在多大程度上參與了ES細胞特性的調(diào)控我們還所知甚少。但越來越多的證據(jù)提示ES細胞特性的調(diào)控有其它因子參與。
　　 Nucleolin是一種廣泛存在于快速增殖細胞中的多功能核仁蛋白，主要參與基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控、染色體重建和RNA的代謝等多種重要的生物學過程。它在未分化的ES細胞中高表達，且表達水平隨著ES細胞的分化而下降，提示它可能在維持ES細胞特性中起著重要的作用。因此，我們有必要進一步研究

3、Nucleolin在ES細胞特性調(diào)節(jié)中的功能。
　　 通過特異性siRNA下調(diào)Nucleolin的表達水平后，我們發(fā)現(xiàn)ES細胞周期阻滯在G1期并且細胞凋亡增多，從而導致ES細胞生長變慢、自我更新能力減弱。此外，無論是在維持未分化還是誘導分化的培養(yǎng)條件下誘導Nucleolin下調(diào)均促進ES細胞向各胚層方向的分化。有趣的是，在這些分化過程中，已知的全能性基因Oct4、Nanog等的表達水平并不受影響，提示Nucleolin可能通過介

4、導獨立于這些已知轉(zhuǎn)錄因子的途徑來發(fā)揮調(diào)控ES特性的作用。這些結(jié)果表明Nucleolin在ES細胞中起著維持細胞存活與增殖、抑制細胞分化并促進ES細胞自我更新的重要作用。
　　 為了進一步研究Necleolin作用的分子機制，我們通過PB(PiggyBac)轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)鑒定到了其中一個可能介導Nucleolin作用的基因Gna13。已有的報道表明，Gna13可以激活JNK通路而引起細胞分化。因此，我們推測Nucleolin可能通過抑

5、制其功能導致JNK通路的阻斷，從而阻止ES細胞向原始內(nèi)胚層方向的分化。此外，我們進一步結(jié)合芯片數(shù)據(jù)分析和蛋白水平的檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)Nucleolin的下調(diào)增加了ES細胞中p53的蛋白量而不改變其mRNA水平，同時多個p53的下游基因也得到激活，提示這很可能是導致ES細胞G1期阻滯以及細胞凋亡的直接原因。
　　 因此，我們的研究表明，在未分化ES細胞中除了Oct4、Nanog等以外的一些基因，如Nucleolin，對于ES細胞自我更