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1、大量研究表明MEF2是GLUT4蛋白轉(zhuǎn)錄過程的必需因子,運(yùn)動(dòng)通過提高M(jìn)EF2/GLUT4 DNA結(jié)合活性而提高GLUT4基因和蛋白的表達(dá),但機(jī)制尚不清楚。
目的:
本文旨在通過研究四周耐力訓(xùn)練對(duì)AMPKα2高表達(dá)轉(zhuǎn)基因和AMPKα2基因敲除鼠,骨骼肌總MEF2含量,核內(nèi)MEF2含量,MEF2/GLUT4 DNA結(jié)合活性以及GLUT4表達(dá)的影響,探討運(yùn)動(dòng)提高骨骼肌MEF2/GLUT4 DNA結(jié)合活性及GLUT4基因和蛋
2、白的表達(dá)可能機(jī)制。
方法:
C57BL/6J野生小鼠、AMPKα2高表達(dá)轉(zhuǎn)基因和AMPKα2基因敲除鼠各20只,按體重各隨機(jī)分為2組:安靜對(duì)照組,耐力訓(xùn)練組,共6組,每組10只。耐力訓(xùn)練組小鼠訓(xùn)練設(shè)計(jì)為0坡度跑臺(tái)運(yùn)動(dòng),跑臺(tái)速度為12m/min,每天訓(xùn)練一個(gè)小時(shí),每周六天,持續(xù)四周。訓(xùn)練組小鼠最后一次訓(xùn)練后12小時(shí)取材。Western blot法測(cè)定AMPK(THr72)磷酸化水平、總MEF2、核內(nèi)MEF2、GLUT4
3、蛋白含量。CHIP法測(cè)定MEF2/GLUT4 DNA結(jié)合活性。Real-Time PCR法測(cè)定GLUT4mRNA含量。
結(jié)果:
野生鼠四周耐力訓(xùn)練后,GLUT4基因表達(dá)量顯著增加的同時(shí)伴隨著MEF2/GLUT4 DNA結(jié)合活性的顯著增加,為運(yùn)動(dòng)通過提高M(jìn)EF2 DNA結(jié)合活性而提高GLUT4表達(dá)提供了進(jìn)一步的證據(jù)。AMPKα2高表達(dá)轉(zhuǎn)基因鼠四周耐力訓(xùn)練后,AMPKα(THr172)磷酸化水平,核內(nèi)MEF2蛋白表達(dá),M
4、EF2/GLUT4 DNA結(jié)合活性,GLUT4基因和蛋白表達(dá)量均顯著高于野生鼠,提示了“運(yùn)動(dòng)- AMPK激活-核內(nèi)MEF2表達(dá)增多-MEF2-GLUT4DNA結(jié)合活性增加-GLUT4基因和蛋白表達(dá)增多”這樣一條通路的存在。雖然四周耐力訓(xùn)練后AMPKα2基因敲除小鼠AMPKα(THr172)磷酸化水平及核內(nèi)MEF2含量均顯著低于野生鼠,但MEF2/GLUT4 DNA結(jié)合活性以及GLUT4基因和蛋白含量與野生鼠相比無顯著差異,提示了在AMP
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