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1、目的:探討冬眠合劑聯(lián)合降溫對(duì)脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)誘導(dǎo)急性肺損傷的保護(hù)作用。
方法:32只4周齡健康雄性SD大鼠,采用完全隨機(jī)方法等分為4組,即對(duì)照組(normol contol group,NC組)、冬眠合劑組(lytic cocktail group,L組)、降溫組(hypothermia group,H組)和冬眠合劑+降溫聯(lián)合組(lytic cocktail+hypothermia,LH組
2、)。各組注射LPS后1h,然后按照以下方法處理:對(duì)照組皮下注射注射生理鹽水(12ml/Kg)后入常溫籠箱,降溫組皮下注射注射生理鹽水(12ml/Kg)后入孔隙襯墊下隔細(xì)碎冰塊籠箱,冬眠合劑組皮下注射冬眠合劑(0.9%生理鹽水100ml+鹽酸哌替啶注射液100mg+鹽酸氯丙嗪注射液50mg+鹽酸異丙嗪注射液50mg,)后入常溫籠箱,冬眠合劑+降溫聯(lián)合組皮下注射冬眠合劑(0.9%生理鹽水100ml+鹽酸哌替啶注射液100mg+鹽酸氯丙嗪注射
3、液50mg+鹽酸異丙嗪注射液50mg,12ml/Kg)后入孔隙襯墊下隔細(xì)碎冰塊籠箱。在各組大鼠LPS注射后1h、2h、4h、8h各時(shí)點(diǎn)采集尾靜脈血,置室溫(20-25℃)靜置4h,再于4℃冰箱靜置20h,再在4℃下2000r離心2min,獲取血清標(biāo)本。嚴(yán)格按照 ELISA試劑盒的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,檢測(cè)血清 IL-1、IL-10、TNF-?、MPO的水平。LPS注射8h后處死大鼠,開(kāi)胸取肺,右下肺組織供作常規(guī)病理學(xué)觀察肺組織損傷的程度,右上
4、肺稱量肺濕重、然后置于70℃恒溫烤箱內(nèi)烘干72 h至完全脫水后再次稱量肺干重,計(jì)算肺濕/干重比值(W/D)。
結(jié)果:冬眠合劑、降溫、聯(lián)合組的大鼠肺組織W/D比值均較對(duì)照組為低,聯(lián)合組大鼠肺組織W/D比值最低,病理切片結(jié)果觀測(cè)結(jié)果顯示與上述改變基本一致。隨著時(shí)間的變化,對(duì)照組IL-1、TNF-α、MPO表達(dá)水平出現(xiàn)逐漸增高趨勢(shì)(P<0.05),而IL-10表達(dá)水平在各時(shí)間點(diǎn)無(wú)差異(P>0.05);冬眠合劑組和降溫組兩組的IL-1
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