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![大劑量維生素E補(bǔ)充對(duì)大鼠抗氧化能力和細(xì)胞功能影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/11/10/6d720f14-d0ac-4695-a603-013939e1edd4/6d720f14-d0ac-4695-a603-013939e1edd41.gif)
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1、目的:通過(guò)補(bǔ)充不同劑量的維生素E,研究大劑量維生素E對(duì)大鼠抗氧化能力和細(xì)胞功能的影響。
方法:取50只初斷乳Wistar大鼠,雌雄各半,將大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、VE1、VE2、VE3、VE4五組,五組大鼠每天給予不同劑量的維生素E灌胃,劑量分別為7.5 mg/kg、15mg/kg、50mg/kg、200mg/kg、750mg/kg,實(shí)驗(yàn)周期為8周。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后處死動(dòng)物并留取全血,分離血漿,同時(shí)制備紅細(xì)胞膜,進(jìn)行抗氧化能力和細(xì)胞
2、功能的分析??寡趸芰Ψ治霭ㄑ獫{超氧化物歧化酶(SOD)活性測(cè)定、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活性測(cè)定、丙二醛(MDA)含量分析及DNA氧化損傷。SOD、GSH-Px及MDA用生化試劑盒測(cè)定,DNA氧化損傷采用“彗星”電泳技術(shù)進(jìn)行分析。細(xì)胞功能分析包括外周血淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率測(cè)定和紅細(xì)胞膜流動(dòng)性測(cè)定。淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率測(cè)定應(yīng)用四甲基偶氮唑鹽(MTT)比色法,紅細(xì)胞膜流動(dòng)性測(cè)定采用熒光偏振法。
結(jié)果:
1、抗氧
3、化能力分析結(jié)果顯示:當(dāng)維生素E劑量為50mg/kg時(shí),與對(duì)照組相比,大鼠血漿維生素E濃度提高了75.6%,SOD活性顯著升高(P<0.01),提高了14.9%,血漿和紅細(xì)胞膜中GSH-Px活性均明顯升高(P<0.05,P<0.01),分別提高了8.4%和51.1%,血漿和紅細(xì)胞膜MDA水平均明顯降低(P<0.01,P<0.01),分別比對(duì)照組下降了57%和47.2%。DNA氧化損傷分析結(jié)果顯示當(dāng)H2O2濃度為10μ mol/1時(shí),50m
4、g/kg VE組的DNA氧化損傷較對(duì)照組顯著降低(P<0.05)。當(dāng)維生素E補(bǔ)充劑量為200mg/kg、750mg/kg時(shí),與對(duì)照組相比,大鼠血漿維生素E水平分別提高了95.8%、117.5%,SOD活性明顯下降(P<0.05),而GSH-Px活性、MDA含量改善不明顯;與50 mg/kgVE組相比,SOD活性明顯下降(P<0.05),血漿和紅細(xì)胞膜GSH-Px活性均明顯降低(P<0.05),血漿和紅細(xì)胞膜MDA水平明顯升高(P<0.0
5、5)。DNA氧化損傷分析結(jié)果顯示當(dāng)H2O2濃度為10μ mol/1時(shí),200mg/kgVE組、750mg/kgVE組的DNA氧化損傷較對(duì)照組均顯著加重(P<0.01,P<0.01)。以上結(jié)果表明,當(dāng)外界損傷因素作用于機(jī)體時(shí),大劑量維生素E不僅沒(méi)有降低DNA氧化損傷,而且還使DNA氧化損傷加重,導(dǎo)致機(jī)體遺傳穩(wěn)定性受到破壞。
2、細(xì)胞功能分析結(jié)果顯示:當(dāng)維生素E劑量為50mg/kg時(shí),大鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率和紅細(xì)胞膜流動(dòng)性均比對(duì)照
6、組明顯提高(P<0.05,P<0.01),當(dāng)維生素E補(bǔ)充劑量為200mg/kg、750mg/kg時(shí),補(bǔ)充200mg/kgVE對(duì)細(xì)胞轉(zhuǎn)化率沒(méi)產(chǎn)生影響(P>0.05),細(xì)胞增殖功能無(wú)明顯變化,當(dāng)補(bǔ)充劑量增加為750mg/kg時(shí),與對(duì)照組相比,大鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率顯著降低(p<0.05)。這兩個(gè)大劑量維生素E補(bǔ)充組對(duì)紅細(xì)胞膜流動(dòng)性均未見(jiàn)明顯改善。
結(jié)論:
1、當(dāng)維生素E補(bǔ)充劑量為50mg/kg時(shí),機(jī)體SOD、GSH-
7、Px等抗氧化酶活性增強(qiáng),血漿MDA水平降低;同時(shí),過(guò)氧化氫誘發(fā)的DNA氧化損傷水平降低;大鼠紅細(xì)胞膜流動(dòng)性和淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率提高。
2、當(dāng)維生素E補(bǔ)充劑量為200mg/kg、750mg/kg時(shí),血漿SOD活性降低,過(guò)氧化氫誘發(fā)的DNA氧化損傷加重;750mg/kg VE使淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率降低。而GSH-Px、MDA、紅細(xì)胞膜流動(dòng)性等在這兩個(gè)大劑量補(bǔ)充組均未見(jiàn)明顯改善。
綜上,當(dāng)維生素E補(bǔ)充劑量為50mg/kg時(shí),
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