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文檔簡介
1、水稻細菌性條斑病由稻黃單孢菌稻生致病變種(Xanthomonas oryzae pv.oryzicola,Xooc)引起的,在水稻生產過程中是一種重要的檢疫性病害。水稻細菌性條斑病是我國4大水稻病害之一,一般導致水稻損失15%~25%,嚴重時可達40%~60%,嚴重威脅水稻的高產穩(wěn)產。防治水稻細菌條斑病以噻唑類殺菌劑為主,防效僅為50%左右。利用生防微生物防治植物病害是極具有應用前景的防治途徑,是世界各國植病專家的研究熱點。本實驗室前期
2、探究篩選得到的生防微生物解淀粉芽孢桿菌Lx-11(Bacillusamyloliquefaciens Lx-11)對水稻細菌性條斑病具有良好防治效果,其盆栽防病效果達62.5%,大田示范試驗防效達60.2%,顯著高于化學藥劑20%葉枯唑的防效(盆栽防效51.2%和大田防效45.8%)。為了更深入的了解生防菌Lx-11對水稻細菌性條斑病的控病機理,本論文從如下方面進行了主要研究:
本文從分泌代謝產物種類、最佳碳源、氮源、無機鹽、
3、微量元素、pH和溫度方面研究了生防菌Lx-11的生物學特性,為今后深入研究生防菌Lx-11的防病機理、產業(yè)化生產及其提高防治效果提供科學依據(jù)。研究結果表明,解淀粉芽孢桿菌Lx-11可產生蛋白酶、纖維素酶和嗜鐵素;最適生長溫度為28℃、最適pH為7.0、最佳碳源為蔗糖、最佳氮源為胰蛋白胨,微量元素甘氨酸(Gly)、谷氨酸(Glu)、VB2、VB6和肌醇均能促進Lx-11的生長,其中Gly促進作用明顯;無機鹽KH2PO3和NaCl能促進Lx
4、-11的生長;生防菌Lx-11在32h前處于對數(shù)生長期,32h之后,菌體生長基本達到穩(wěn)定。正交試驗所得最優(yōu)培養(yǎng)基組合為酵母膏1g.L-1、蔗糖5g.L-1、胰蛋白胨6g.L-1、甘氨酸0.01g.L-1和氯化鈉0.15g.L-1。
其次,生防微生物能通過促進植株的生長來抵御病原菌的侵襲及蔓延。在推廣應用過程中,發(fā)現(xiàn)噴施Lx-11發(fā)酵菌液后,水稻葉片綠色加深,生長勢良好。為了明確該菌株是否對水稻生長具有促生作用,本文從生防菌株L
5、x-11對水稻的促生效果和分泌產生的促生物質兩個方面開展了研究,結果表明,生防菌Lx-11菌液濾液稀釋后對水稻種子和幼苗均有一定的促生作用,且隨著菌液稀釋倍數(shù)的增加,促生作用增加,稀釋倍數(shù)為100倍時,對水稻種子和幼苗的形態(tài)和生理指標均有最明顯促生效果,當稀釋倍數(shù)達到200之后,其對水稻的促生效果下降;用原無菌上清處理水稻時,其對水稻葉綠素含量的積累和根系活力有一定得抑制作用。高相液相色譜測定了上清液中含有與促生相關的物質赤霉素(GA3
6、)、脫落酸(ABA)、生長素(IAA)、細孢分裂素(Cytokinins)和亞精胺(Sperdimine),且含量分別為75.5ng.mL-1(GA3)、3130ng.mL-1(ABA)、1200ng.mL-1(IAA)、1510ng.mL-1(Cytokinins)。811ng.mL-1(Sperdimine)。
前人研究表明生防菌能激發(fā)植物的誘導抗病性信號通路,提高植株的抗病能力,誘導抗病性也是主要的植物抗病機制之一。本文
7、以Lx-11菌液、b5-16菌液單獨以及同時處理水稻葉片,檢測了不同處理在0h、12h、24h、48h和72h時,水稻葉片中防衛(wèi)反應基因PR4、PR10a、PAL、LOX和POX的相對表達量,以及抗氧化酶系POD、SOD、CAT、H2O2的活性。試驗表明生防菌Lx-11、病原菌b5-16單獨或同時處理時,水稻葉片中防衛(wèi)反應基因PR4、PR10a、PAL、LOX和POX的相對表達量均有變化,且生防菌Lx-11單獨處理或生防菌Lx-11和病
8、原菌b5-16同時處理時,防衛(wèi)反應基因的相對表達量高于病原菌b5-16單獨處理。生防菌Lx-11和病原菌b5-16同時處理水稻時,抗氧化酶系POD、SOD、CAT、H2O2與CK相比顯著提高,生防菌Lx-11或b5-16單獨處理水稻時,與CK相比抗氧化酶系均無明顯變化。研究結果表明解淀粉芽孢桿菌Lx-11能夠誘導水稻植株防衛(wèi)反應基因(PR4、PR10a、PAL、LOX、POX)的表達以及抗氧化酶(POD、SOD、CAT、H2O2)活性的
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