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文檔簡(jiǎn)介
1、由病原菌Avenae avenae subsp.avenae引起的水稻細(xì)菌性褐條病隨著近年來(lái)暴風(fēng)雨等惡劣天氣的影響,其發(fā)病趨勢(shì)越來(lái)越嚴(yán)重。
本論文通過(guò)對(duì)病原菌基因組測(cè)序、生物信息學(xué)分析,得到12個(gè)六型分泌系統(tǒng)vgrG基因。利用分子進(jìn)化遺傳分析軟件MEGA v.5.0.3對(duì)12個(gè)vgrG基因序列分析,得到8個(gè)核心vgrG基因(vgrG1-8)。分別利用CFSSP、GOR4兩種方法預(yù)測(cè)核心vgrG蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu),最終選出2個(gè)vgrG
2、基因(vgrG1-2)進(jìn)行功能研究。
首先,依據(jù)同源交換原理,通過(guò)構(gòu)建重組質(zhì)粒,轉(zhuǎn)化、篩選表達(dá),實(shí)現(xiàn)特定基因的定點(diǎn)突變,構(gòu)建2個(gè)突變體菌株△vgrG1、△vgrG2并對(duì)其理化特性和致病性研究。結(jié)果表明,vgrG1/vgrG2基因的突變導(dǎo)致細(xì)菌的致病性喪失,且抗逆性減弱。其次,利用RT-PCR技術(shù)研究不同培養(yǎng)條件下突變體菌株中六型分泌系統(tǒng)基因的表達(dá)變化,結(jié)果顯示:vgrG1-2基因的突變直接導(dǎo)致其他六型分泌系統(tǒng)基因表達(dá)異常,且在
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