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文檔簡介
1、濱海濕地是地球上生產(chǎn)力最高、生物多樣性最豐富、生態(tài)功能最具價值的濕地生態(tài)系統(tǒng)之一,因其獨特的生態(tài)環(huán)境及其在營養(yǎng)物質(zhì)循環(huán)、污染物截留和侵蝕控制等方面的顯著作用而廣受關(guān)注。近年,我國濱海濕地呈現(xiàn)總面積持續(xù)減少,自然濕地面積銳減,而人工濕地和非自然濕地面積劇增的變化趨勢。導(dǎo)致濱海濕地受損的原因主要有五大方面:海岸圍墾、過度收獲、污染、外來物種入侵和全球氣候變化。
鹽田港位于福建省寧德市溪尾鎮(zhèn),是三沙灣重要的水域之一,溪尾灣位于溪尾鎮(zhèn)
2、,是重要的牡蠣養(yǎng)殖基地。近年來,由于人類養(yǎng)殖、開墾活動、米草入侵等因素影響,鹽田港特別是溪尾灣的生境退化現(xiàn)象嚴(yán)重。為實現(xiàn)溪尾灣生境恢復(fù),2012年-2015年期間,本研究對溪尾灣采取生境修復(fù)策略,主要開展海岸人工濕地與海水生態(tài)浮床技術(shù)相結(jié)合的陸源污染物攔截與消減,其中在溪尾灣主要進(jìn)行紅樹林濕地擴容及人工濕地培育的修復(fù)策略。微生物是濱海濕地生態(tài)系統(tǒng)的重要組成部分,在物質(zhì)循環(huán)和能量流動中發(fā)揮巨大作用。因此,沉積物中微生物的群落結(jié)構(gòu)常被用于指
3、示生境修復(fù)的狀況。目前,高通量測序方法因其準(zhǔn)確性強、數(shù)據(jù)量大、快速等優(yōu)點被用于土壤微生物群落結(jié)構(gòu)的研究。本論文應(yīng)用基于Illumina高通量測序平臺比較不同生境修復(fù)策略下的微生物群落結(jié)構(gòu)差異,探究時空尺度上微生物群落結(jié)構(gòu)變化規(guī)律;應(yīng)用可培養(yǎng)技術(shù)分離純化可培養(yǎng)的細(xì)菌,從中篩選石油烴降解菌并進(jìn)行石油烴降解菌的降解特性研究。主要結(jié)果歸納如下:
(1)鹽田港溪尾灣沉積物微生物群落結(jié)構(gòu)調(diào)查,經(jīng)高通量測序共鑒定微生物26個門66個綱,其中
4、變形菌門(Proteobacteria)占絕對優(yōu)勢(占44.4%-65.7%),其次依次是綠彎菌門(Chloroflexi)(占4.6%-10.0%)和酸酐菌門(Acidobacteria)(占4.1%-9.0%)。γ-變形菌綱(Gammaproteobacteria)、α-變形菌綱(Alphaproteobacteria)和δ-變形菌綱(Deltaproteobacteria)是絕對優(yōu)勢類群。在屬的水平上,各樣本的群落結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)出相同結(jié)
5、果,且包含多種已報道的功能微生物類群。微生物多樣性隨時間和空間的變化有所差異,具體來說空間上,光灘區(qū)微生物多樣性>米草區(qū)>紅樹林區(qū),功能降解菌多樣性是米草區(qū)>光灘區(qū)>紅樹林區(qū),棍狀厭氧菌屬(Anaerorhabdus)僅存在新光灘生境中,互營單胞菌屬(Syntrophomonas)僅存在紅樹林生境中;隨時間的推移,微生物多樣性呈現(xiàn)降低的趨勢,且不同年份,優(yōu)勢菌屬有所差異,2012年以酸桿菌門(Acidobacteria)的GP21屬和芽
6、孢八疊球菌屬(Sporosarcina)為優(yōu)勢菌屬,2013年-2015年樣品多以變形菌門(Proteobacteria)不同的細(xì)菌屬占優(yōu)勢,2013年樣品多以ε-變形菌綱(Epsilonproteobacteria)的Sulfurovum屬占優(yōu)勢,2014年樣品多以δ-變形菌綱(Deltaproteobacteria)的暗桿菌屬(Pelobacter),2015年樣品多以γ-變形菌綱(Gammaproteobacteria)的Hali
7、ea屬占優(yōu)勢。
(2)通過可培養(yǎng)方法,從2014年及2015年沉積物樣品中分離到25株細(xì)菌,16S rRNA基因鑒定結(jié)果顯示這些細(xì)菌分屬于3門15屬25種。應(yīng)用選擇性培養(yǎng)基,獲得2株石油烴降解菌,3株多環(huán)芳烴(Polycyclic aromatic hydrocarbons,PAHs)降解菌。
經(jīng)16S rRNA基因鑒定,2株石油烴降解菌分別為Rhodococcus sp.14C1-JGC2-1-1和Acinetob
8、acter sp.14C1-JHC2-1-1。采用改良平板升華法成功地篩選到3株P(guān)AHs降解菌,16S rRNA基因鑒定結(jié)果顯示這3株菌分別為Croceicoccus sp.14P-JHC2-1, Jiella sp.15P-JC2G-3和Thioclava sp.15P-JC3G-3。
用GC-MS測定2株石油烴降解菌對石油中的飽和烴和芳烴組分的降解,扣除非生物因素的損失(11.9%),降解菌對石油烴的降解能力分別為19.4
9、%和25.3%。用 SPE-HPLC(Solid phase extraction-high performance liquidchromatography,SPE-HPLC)測定3株菲降解菌對菲的降解能力,結(jié)果顯示,降解菌Croceicoccus sp.14P-JHC2-1、Jiella sp.15P-JC2G-3和Thioclava sp.15P-JC3G-3,在168 h后對初始濃度為100 mg/L的菲分別降解了95.4%,6
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