1、泡沫病毒屬于反轉錄病毒科泡沫病毒亞科,其在體外雖可使細胞發(fā)生強烈病變,在體內卻不表現(xiàn)任何病癥,處于長期潛伏感染狀態(tài),而其潛伏機制目前尚不清楚。目前為止,只有一篇關于過表達早幼粒細胞白血病蛋白(PML)能夠抑制人泡沫病毒(PFV)復制的報道,但隨后的研究卻表明,PML與PFV處于潛伏狀態(tài)無關。因而可推知在細胞中一定存在其它一些重要的細胞蛋白介導泡沫病毒處于長期潛伏狀態(tài)。 本文以牛泡沫病毒中國毒株BFV3026為材料,利用酵母雙雜交

2、系統(tǒng),通過釣取與BFV的反式激活因子BTas相互作用的細胞蛋白,探討B(tài)FV感染細胞后病毒與宿主細胞的相互作用,并期望通過該方法,找到抑制BTas反式激活作用以使BFV處于潛伏感染的細胞蛋白。除此之外,本文還對BTas自身的功能進行深入探究。 本文獲得了以下重要結果及結論：1.通過酵母雙雜交首次“釣”出并確證了兩種與BTas相互作用的細胞蛋白：干擾素誘導的35 KDa的蛋白(IFP35)和NF-kB旁路中重要的蛋白(RelB);2

3、.選擇IFP35進行深入的功能探討,發(fā)現(xiàn)IFP35能夠通過其與BTas的相互作用抑制BTas介導的對BFV自身主要啟動子LTR的反式激活作用,這種抑制作用依賴于其結構的完整性；3.IFP35不但能夠抑制BFV的復制,亦能夠抑制PFV的復制；4.實驗證實內源性的IFP35對BFV的復制具有很強的抑制作用,由此推測IFP35可能是BFV在宿主細胞內處于長期潛伏的重要原因；5.在對IFP35進行研究的基礎上,發(fā)現(xiàn)另一與IFP35具有相似結構的

4、蛋白Nmi也能有效抑制BFV的復制,并證實Nmi不但能夠通過其與BTas的相互作用來抑制BTas介導的對BFV LTR的反式激活功能,還能抑制BTas對內部啟動子(IP)的反式激活作用,其抑制機理是通過與BTas相互作用后將BTas滯留在漿中而實現(xiàn)的；6.發(fā)現(xiàn)BTas能夠在體內形成二聚體,并界定了其二聚化的區(qū)域為46-62 aa;證實當缺失了該二聚化區(qū)段后,雖然并不影響B(tài)Tas的核定位及其結合LTR和IP的能力,卻會使得BTas的反式激