1、當(dāng)下，人工甜味劑因其特有的性質(zhì)作為蔗糖的替代品被廣泛應(yīng)用于食品及飲料生產(chǎn)中，它們既能提供甜味感受，又不被機(jī)體代謝，在很長一段時期內(nèi)被人們認(rèn)為是安全的。但近年來，隨著人工甜味劑的使用越來越多，一些代謝疾病也愈演愈烈。越來越多的科學(xué)研究表明，人工甜味劑的應(yīng)用對機(jī)體的生理功能有較大影響，可能會導(dǎo)致代謝紊亂，進(jìn)而誘發(fā)肥胖、Ⅱ型糖尿病和心血管疾病等的發(fā)生，人工甜味劑的危害被越來越多的關(guān)注。甜味受體作為感應(yīng)人工甜味劑的一種重要的分子，由兩部分亞基組

2、成(T1R2、T1R3)，參與了許多生理代謝過程。近年來的研究表明，甜味受體不只存在于口腔，還存在于許多其它組織中，而這一發(fā)現(xiàn)，進(jìn)一步引發(fā)了人們對人工甜味劑參與代謝調(diào)節(jié)的機(jī)制的思考。本研究則先從宏觀角度，利用多種人工甜味劑暴露ICR小鼠模型，著重探究人工甜味劑對小鼠機(jī)體部分組織及生理功能的影響。通過分子生物學(xué)技術(shù)如Western Blotting、qPCR、細(xì)胞免疫熒光、動物行為學(xué)調(diào)查，來揭示其中的分子機(jī)制。結(jié)果如下:
　　(1)

3、人工甜味劑暴露對小鼠部分組織上甜味受體亞基T1R3表達(dá)的影響:
　　通過使用糖精、三氯蔗糖、安賽蜜三種常見甜味劑，選定甜度為12，對ICR小鼠進(jìn)行一定周期暴露后，利用Western Blotting技術(shù)檢測其部分組織（肝、腎、胃、膀胱、睪丸）上T1R3蛋白水平的表達(dá)量變化。結(jié)果表明:多種人工甜味劑的暴露，均會使肝上T1R3表達(dá)量顯著上調(diào)，睪丸和膀胱也有上調(diào)趨勢，而腎上T1R3基本無變化。胃上T1R3在不同甜味劑條件下略有不同，在糖

4、精暴露后，T1R3略有上調(diào)，三氯蔗糖暴露后，略有下調(diào)，而安賽蜜暴露后顯著下調(diào)。
　　(2)人工甜味劑暴露對小鼠不同腸段T1R3表達(dá)的影響:
　　進(jìn)一步對小鼠腸道展開探究，利用細(xì)胞免疫熒光技術(shù)，對腸道甜味信號通路上的相關(guān)蛋白質(zhì)進(jìn)行標(biāo)記定位，結(jié)果證實(shí)了甜味信號通路相關(guān)蛋白在腸道內(nèi)分泌細(xì)胞上表達(dá)。用多種人工甜味劑對小鼠暴露后，檢測小鼠腸道不同腸段（十二指腸、空腸、回腸）上甜味受體亞基T1R3蛋白水平表達(dá)量的變化。結(jié)果表明:多種人工

5、甜味劑的暴露均會使小鼠十二指腸上T1R3表達(dá)量顯著上調(diào)，且糖精的暴露也會使小鼠空腸、回腸上的T1R3表達(dá)量顯著上調(diào)，其余兩種甜味劑卻不會。
　　(3)進(jìn)一步探究人工甜味劑對膀胱功能的影響及其可能機(jī)制。
　　上述結(jié)果中表明，人工甜味劑的暴露對小鼠膀胱上甜味受體亞基T1R3表達(dá)量有影響，為了深入探究人工甜味劑暴露對小鼠膀胱功能的影響，進(jìn)行了動物行為學(xué)調(diào)查。結(jié)果表明:一定周期人工甜味劑暴露后會使小鼠相對排尿量增加，并且在糖精組和A

6、K組有顯著性差異。而三氯蔗糖組，雖然都有上升，但都沒有顯著性。進(jìn)一步對其甜味受體進(jìn)行蛋白水平和mRNA水平表達(dá)的檢測，發(fā)現(xiàn)甜味劑暴露組動物膀胱中甜味受體表達(dá)量顯著高于對照組。上述結(jié)果暗示，人工甜味劑長期暴露引起的機(jī)體排尿量增加可能與膀胱甜味受體表達(dá)量密切相關(guān)。
　　綜上所述，本研究通過人工甜味劑暴露后的小鼠模型，來探究人工甜味劑對機(jī)體多組織上甜味受體表達(dá)的影響。結(jié)果表示部分組織上甜味受體的表達(dá)會發(fā)生變化，尤其是對小腸和膀胱上甜味受