1、鰱（Hypophthalmichthys molitrix）是我國主要的淡水養(yǎng)殖魚類，年總產(chǎn)量居我國淡水養(yǎng)殖產(chǎn)量的第二位。在養(yǎng)殖和運(yùn)輸過程中容易遭受低氧脅迫，引起浮頭、窒息、泛塘等缺氧現(xiàn)象，極易造成死亡，導(dǎo)致經(jīng)濟(jì)損失。因此，研究低氧對鰱機(jī)體的生理脅迫及其損傷機(jī)理，將為鰱生產(chǎn)和運(yùn)輸技術(shù)的改進(jìn)提供基礎(chǔ)資料，具有重要應(yīng)用價(jià)值。
　　本研究將實(shí)驗(yàn)魚置于密閉水箱，通過魚體自發(fā)耗氧進(jìn)行低氧處理（H組），分別在低氧處理后2、6、10h（輕、中度

2、低氧）和18h（嚴(yán)重低氧）時(shí)取樣。采用生理生化方法測定鰱血清生化指標(biāo)和組織氧化應(yīng)激指標(biāo)，探討低氧對鰱心臟、腦、肝胰臟和腎臟的生理功能和組織損傷的影響。隨后，再次采取密封處理至鰱嚴(yán)重浮頭以后進(jìn)行復(fù)氧處理（R組），在恢復(fù)充氧0、1、2、4、8h時(shí)取樣，測定血清生化指標(biāo)和組織氧化應(yīng)激指標(biāo)，分析鰱組織器官在復(fù)氧之后的健康狀況。由于Ca2+與細(xì)胞死亡密切相關(guān)，能夠參與到細(xì)胞凋亡途徑中，與凋亡調(diào)控因子相互作用，調(diào)控細(xì)胞凋亡。本研究設(shè)置了急性嚴(yán)重低氧

3、脅迫處理，進(jìn)一步研究低氧對鰱心肌細(xì)胞凋亡和鈣穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)的影響，檢測了心肌Na+/K+-ATPase、Ca2+-ATPase活性變化；通過TUNEL法檢測了心肌細(xì)胞凋亡情況；并結(jié)合qPCR技術(shù)分析了凋亡相關(guān)基因bax、bcl-2 mRNA和鈣穩(wěn)態(tài)相關(guān)基因calm（鈣結(jié)合蛋白）、LETM1（亮氨酸拉鏈-EF-手型跨膜蛋白1）mRNA的表達(dá)變化。主要結(jié)果如下：
　?。?）低氧與復(fù)氧對鰱血清生化指標(biāo)的影響。隨著低氧處理時(shí)間的延長，心肌酶CK

4、和腎功能相關(guān)指標(biāo)UREA、UA逐漸升高，肝功能相關(guān)指標(biāo)ALT、AST、ALP和代謝相關(guān)指標(biāo)TP、TG、TC先呈下降趨勢再升高。復(fù)氧以后，ALT、AST、ALP、UREA、TP、TC逐漸升高，CK、UA逐漸下降。復(fù)氧8h時(shí)，CK、ALT、AST顯著高于NC組（常氧對照組），TG顯著低于NC組，其余指標(biāo)與NC組無顯著差異。溶解氧變化對TBIL、CREA、Cl-、Ca2+影響不顯著。
　?。?）低氧與復(fù)氧對鰱心臟、腦、肝胰臟和腎臟氧化應(yīng)

5、激指標(biāo)的影響。
　?、俚脱跆幚砗?，鰱心臟 SOD和 MDA逐漸增多，CAT逐漸減少，H10組 SOD、GSH、MDA均達(dá)到最高值；腦SOD和GSH顯著性上升再下降，MDA顯著下降，H18組CAT達(dá)到最高；肝胰臟SOD、CAT和MDA在2h時(shí)顯著升高，隨后SOD、CAT和GSH均降低再逐漸升高，MDA逐漸下降；腎臟SOD和CAT顯著升高，H18組雖有下降，仍然顯著高于H0組。
　?、谥卸鹊脱鹾笤購?fù)氧處理?xiàng)l件下，心臟SOD顯著下

6、降，CAT顯著升高；腦SOD、CAT和GSH均表現(xiàn)出先降后升再降的趨勢，R4組所有指標(biāo)達(dá)最高值；肝胰臟SOD、CAT和GSH呈波動(dòng)性變化，MDA逐漸升高；腎臟SOD和CAT顯著下降，GSH與MDA呈現(xiàn)顯著性波動(dòng)性變化。復(fù)氧8h時(shí)，肝胰臟、腎臟及心臟和腦的其他氧化應(yīng)激指標(biāo)與NC組無顯著性差異，心臟CAT顯著低于NC組，MDA顯著高于NC組，腦CAT和MDA顯著低于NC組，GSH顯著高于NC組。
　?。?）低氧誘導(dǎo)鰱心肌細(xì)胞凋亡。TU

7、NEL組織形態(tài)學(xué)檢測結(jié)果表明低氧會誘導(dǎo)鰱心肌細(xì)胞凋亡，凋亡細(xì)胞數(shù)隨著氧濃度的降低而增加，對照組細(xì)胞凋亡指數(shù)為7.69±2.96、浮頭組為47.94±1.87、死亡組為85.39±2.61，各組間差異極顯著（P＜0.01）。qPCR結(jié)果顯示心臟bax mRNA逐漸上調(diào)，死亡組顯著高于對照組和浮頭組；bcl-2 mRNA逐漸下調(diào)，死亡組和浮頭組顯著低于對照組。
　?。?）低氧對鰱心肌細(xì)胞鈣穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)的影響。在氧濃度下降過程中，Na+/K

8、+-ATPase和Ca2+-ATPase酶活力先降低后升高，calm mRNA先下調(diào)再上調(diào)，LETM1 mRNA逐漸升高，死亡組四個(gè)指標(biāo)均顯著高于浮頭組。
　　結(jié)果表明，輕、中度低氧處理引起鰱心臟、腦、肝胰臟和腎臟部分生理功能障礙及氧化應(yīng)激反應(yīng)；嚴(yán)重低氧脅迫可能會引起鰱組織器官不可逆損傷和強(qiáng)烈的氧化應(yīng)激反應(yīng)，甚至導(dǎo)致死亡。缺氧后再復(fù)氧，肝臟和腎臟生理功能基本恢復(fù)正常，腦和心臟的部分氧化應(yīng)激指標(biāo)不能恢復(fù)，提示缺氧對腦和心臟損傷更嚴(yán)重