1、華中農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文水稻T-DNA插入突變體庫的創(chuàng)建及兩個細(xì)胞壁合成相關(guān)基因的功能分析姓名：李向俊申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：張啟發(fā)；吳昌銀200903水稻T - D N A 插入突變體庫的創(chuàng)建及利用此突變體庫對兩個細(xì)胞壁合成相關(guān)基因的克隆因主要在維管束以及皮層厚壁組織細(xì)胞這樣一些木質(zhì)化程度比較高的細(xì)胞中表達(dá)。對突變體不同組織部位的總蛋白進行C A D 酶和S A D 酶活性測定發(fā)現(xiàn)，C A D 酶活性在莖

2、稈第一節(jié)間和穗這兩個F C l 基因表達(dá)量比較高的地方降低很多，S A D 酶的活性在突變體與對照中都較低。綜合以上這些結(jié)果顯示了F C l 基因在木質(zhì)素的生物合成以及調(diào)控莖稈強度上有重要的作用。0 3 2 1 1 G C 0 9 突變體的田間表型為矮小、分蘗少、抽穗遲，并且在溫室中其表型有所恢復(fù)。分子檢測顯示，T - D N A 插入造成了一個水稻甘油．3 ．磷酸?；D(zhuǎn)移酶( G R 玎) 基因的失活。在水稻中共有1 6 個G P A

3、 T 基因，根據(jù)基因家族的聚類分析，我們將此基因命名為O s G P A T l l 。O s G P A T l l 基因主要在苗期、莖以及花中表達(dá)，體外酶活測定顯示其具有?；D(zhuǎn)移酶的活性。對o s g p a t l l 突變體的葉片總甘油酯、表面蠟質(zhì)的分析結(jié)果并沒有發(fā)現(xiàn)與野生型有顯著差異，但是其葉片角質(zhì)單體比野生型顯著降低。o s g p a t l l 突變體對非生物逆境的抗性顯著降低，對旱脅迫和鹽脅迫比野生型更加敏感，葉片失水