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![農藥多殘留免疫芯片-納米金增敏型檢測體系構建.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-2/24/2/0b86c1ee-b7c7-49c3-a46c-fe689361d9e3/0b86c1ee-b7c7-49c3-a46c-fe689361d9e31.gif)
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文檔簡介
1、隨著農藥種類及數量的不斷增多,實現多殘留檢測已成為農藥免疫分析方法的必然趨勢。本文以硝酸纖維素膜為載體,抗原為捕獲探針,膠體金做標記材料,制作了一個含有7個抗原抗體組合的可視化免疫芯片,可同時檢測三唑磷、對硫磷、甲基對硫磷、殺螟硫磷、甲氰菊酯、克百威、噻蟲啉、百菌清和多菌靈9種農藥。通過對免疫芯片反應的各項條件進行優(yōu)化,確定了間接競爭檢測模式、芯片載體類型、反應抗原抗體的濃度、金標二抗的稀釋倍數、封閉液、金增強液、反應緩沖液種類、pH、
2、 NaCl濃度、反應緩沖液中有機助溶劑含量及各個步驟的反應時間。
在最適優(yōu)化條件下,三唑磷檢測靈敏度(IC50)、最低檢出限(LOD,IC10)及肉眼檢出限(vLOD)分別為0.41 ng/mL、0.02 ng/mL、1 ng/mL;甲基對硫磷為10.77 ng/mL、0.38 ng/mL、100 ng/mL;甲氰菊酯為2.24 ng/mL、0.13ng/mL、10 ng/mL;克百威為27.22 ng/mL、3.76 ng/
3、mL、100 ng/mL;噻蟲啉為46.52 ng/mL、4.51 ng/mL、100 ng/mL;百菌清為1.17 ng/mL、0.20 ng/mL、5 ng/mL;多菌靈為0.61 ng/mL、0.07 ng/mL、5 ng/mL;對硫磷為279.5 ng/mL、2.4ng/mL、1000 ng/mL;殺螟硫磷為77.9 ng/mL、0.6 ng/mL、500ng/mL。此靈敏度可與經典的ELISA法相媲美,各藥的最低檢出限均可滿足
4、我國對食品中農藥最大殘留限量MRL值的規(guī)定(GB2763-2014)。
實驗結果表明,該免疫芯片分析方法具有較好的準確性和精密度。將其應用于蔬菜、水果和谷物類樣品檢測,在首先確定了基質效應及稀釋倍數后,樣品添加回收率實驗結果表明,絕大多數農藥的添加回收率為70.1%-119.1%,變異系數為4.12%-19.93%,滿足農藥殘留分析的基本要求。儀器比對實驗表明,該方法與質譜儀具有較高的相關性,相關系數(R2)高達0.94。
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