1、獸藥種類繁多，根據(jù)用途可分為促生長劑、抗生素、抗寄生蟲藥、鎮(zhèn)靜劑等。許多藥物使用后容易在動(dòng)物體內(nèi)殘留并最終通過食物鏈進(jìn)入人體。人們長期攝入含有獸藥殘留的動(dòng)物性產(chǎn)品可能導(dǎo)致中毒現(xiàn)象，甚至有致畸、致癌、致突變等效應(yīng)，嚴(yán)重危害人體健康。為確保食品安全，我國農(nóng)業(yè)部發(fā)布的235號(hào)公告中明確規(guī)定了動(dòng)物性食品中獸藥殘留的限量標(biāo)準(zhǔn)，并要求β-受體激動(dòng)劑類藥物、人工合成激素類藥物、鎮(zhèn)靜劑類藥物、硝基呋喃類和硝基咪唑類抗生素等多種藥物在動(dòng)物源性食品中不得檢

2、出。為了滿足對(duì)這些禁用藥物測定的高靈敏度要求，并盡量避免假陽性結(jié)果的出現(xiàn)，開發(fā)具有高靈敏度和高分辨率的檢測技術(shù)勢在必行。
　　 本實(shí)驗(yàn)通過優(yōu)化豬肉和豬尿兩種豬樣品基質(zhì)中20種獸藥殘留的前處理方法和色譜/質(zhì)譜條件，建立了一種豬肉及豬尿中20種禁用獸藥的超高效液相色譜-四級(jí)桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜（Ultra Performance Liquid Chromatography-Quadrupole-time ofFlight Mass Sp

3、ectrometry, UPLC-Q-TOF/MS）高分辨篩查方法;建立了豬尿中20種禁用藥物殘留的高效液相色譜-電噴霧-離子漏斗-質(zhì)譜/質(zhì)譜（High Performance Liquid Chromatography-Electrospray Ionization-ion Funnel-Mass spectrometry/Mass Spectrometry, HPLC-ESI-iFunnel-MS/MS)測定方法。
　　 本

4、論文的主要工作如下:
　　 1.建立了一種豬肉及豬尿液中20種禁用獸藥的UPLC-Q-TOF/MS檢測方法。豬肉樣品經(jīng)0.1％乙酸乙腈提取后用HLB柱凈化處理，尿液樣品過HLB凈化。甲醇洗脫，氮?dú)獯蹈?，乙?水(1∶9，v/v)定容后過膜檢測。C18色譜柱分離，質(zhì)譜離子化模式為電噴霧正離子模式，先根據(jù)各化合物母離子精確質(zhì)荷比得到相應(yīng)的提取離子色譜圖，根據(jù)提取離子流色譜圖建立外標(biāo)定量方法。通過碰撞誘導(dǎo)解離方式優(yōu)化碰撞能量，得到子離

5、子精確質(zhì)荷比，進(jìn)一步對(duì)目標(biāo)物做定性分析。20種化合物在5～500μg/L范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，線性相關(guān)系數(shù)均大于0.99。20種化合物的檢出限(Limits of Detection，LOD)為2～5μg/L，以豬肉為基質(zhì)方法的定量限(Limit of Quantitative，LOQ)為5～10μg/kg，尿液基質(zhì)方法的定量限為5～10μg/L。分別以1、2和4倍定量限的三個(gè)添加水平做回收試驗(yàn)，結(jié)果表明方法平均回收率在64.1％～1

6、12.6％之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(Relative Standard Deviations，RSD)為3.0％～19.8％。應(yīng)用已建立的篩查方法對(duì)北京超市及市場中4種豬肉樣品進(jìn)行檢測，結(jié)果未發(fā)現(xiàn)殘留有以上20種獸藥的陽性樣品。
　　 2.建立了一種豬尿液中20種禁用藥物的HPLC-ESI-iFunnel-MS/MS檢測的方法。尿液樣品直接經(jīng)過HLB固相萃取柱凈化，甲醇洗脫，氮?dú)獯蹈珊?，乙?水(1∶9，v/v)定容至lmL，過膜后直

7、接分析，采用Eclipse Plus C18柱高效液相色譜分離，電噴霧正離子電離模式，采用雙離子漏斗技術(shù)使離子聚焦，多反應(yīng)離子監(jiān)測(Multiple Reaction Monitoring，MRM)掃描，外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量。結(jié)果表明3個(gè)加標(biāo)濃度下，20種藥物平均加標(biāo)回收率為81.5％～104.8％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.0％～16.0％，各物質(zhì)的檢出限為0.05～0.2μg/L，方法的定量限為0.1～0.5μg/L。本文建立的豬尿液中20種