紅花中亞精胺類化合物及其生物活性研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、紅花是菊科紅花屬植物紅花(Carthamus tinctorius L.)的干燥管狀花,具有活血通經(jīng)、散瘀止痛、降血壓和降血脂等功效,在我國已有2500年的藥用歷史。目前,從紅花中已分離得到250多個化學(xué)成分,包括黃酮類、生物堿類、聚炔類、烷基二醇類、有機(jī)酸類、甾體類、亞精胺類等。亞精胺類化合物即具有H2N(CH2)3NH(CH2)4NH2結(jié)構(gòu)單元的多胺類化合物,顯示出了廣泛的生物活性,但對此類化合物的生物活性的研究多見于某一個單體化合

2、物,未見系統(tǒng)研究不同構(gòu)型的亞精胺類化合物的生物活性差異,趙剛等人曾報道亞精胺類化合物 N1, N5-(Z)-N10-(E)-tri-p-coumaroylspermidine對5-羥色胺(5-HT)再攝取有良好的抑制作用,因此,本文旨在分離紅花中4個不同構(gòu)型的香豆?;〈膩喚奉惢衔?,研究4個亞精胺類化合物對5-HT再攝取的抑制作用,初步探討不同構(gòu)型的亞精胺類化合物對5-HT再攝取的抑制作用的差異。此外,對亞精胺類化合物的分離以及生

3、物活性的研究已見多篇文獻(xiàn)報道,但對亞精胺類化合物的含量測定研究卻未見文獻(xiàn)報道,因此本文首次建立了可同時測定4個亞精胺類化合物含量的高效液相色譜分析方法,為以后亞精胺類化合物的含量測定研究提供了基礎(chǔ)。
  主要研究工作如下:
  1.亞精胺類化合物分離純化:首先采用中低壓柱色譜對紅花乙酸乙酯提取物進(jìn)行極性分段;利用HPLC-Q- Exactive-MS技術(shù)快速尋找亞精胺類化合物所在部位;然后,采用Sephadex-LH20柱分

4、離、制備型高效液相色譜等方法分離目標(biāo)化合物;最后,通過 ESI-MS數(shù)據(jù)、HPLC-Q- Exactive-MS結(jié)果、以及1H-NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)對照等方法,鑒定化合物的結(jié)構(gòu)。最終分離得到4種亞精胺類化合物和一種芳香類化合物以及一種黃酮苷類化合物,分別為 N1,N5,N10-(Z)-tri-p-coumaroylspermidine(1), N1,N5-(Z)-N10-(E)-tri-p-coumaroylspermidine(2), N

5、1(E)-N5-(Z)-N10-(E)-tri-p-coumaroylspermidine(3), N1,N5,N10-(E)-tri-p-coumaroyl-spermidine(4),紫丁香苷(5)以及山奈酚3-O-蕓香糖苷(6)。
  2.亞精胺類化合物光致異構(gòu)現(xiàn)象:文獻(xiàn)報道反式結(jié)構(gòu)的亞精胺類化合物存在光致異構(gòu)現(xiàn)象,因此,本文采用 HPLC法,觀察了各亞精胺類化合物在日光或者254 nm紫外光照射下的光致異構(gòu)現(xiàn)象。結(jié)果發(fā)現(xiàn)發(fā)

6、現(xiàn)各亞精胺類化合物單體在光照條件下可轉(zhuǎn)化為其余三種異構(gòu)體,并最終以一定比例的混合物的形式存在。光照條件相同時,不同構(gòu)型的化合物最終可達(dá)到同一個平衡狀態(tài),光照條件不同時,光致異構(gòu)化后達(dá)到的平衡狀態(tài)亦不同,即各亞精胺類化合物光致異構(gòu)化后最終達(dá)到的平衡狀態(tài)因光照條件的不同而不同。此外,在避光條件下各亞精胺類化合物則均較穩(wěn)定,未有異構(gòu)現(xiàn)象發(fā)生。
  3.亞精胺類化合物生物活性研究:采用經(jīng)典的大鼠腦突觸體[3H]-5-HT再攝取抑制實驗方法

7、,初步研究了4個不同構(gòu)型的亞精胺類化合物對大鼠腦突觸體[3H]-5-HT再攝取的抑制作用,結(jié)果顯示4個亞精胺類化合物對[3H]-5-HT再攝取皆有抑制作用,但在同一濃度水平下,不同構(gòu)型的亞精胺類化合物對[3H]-5-HT再攝取的抑制效果不同,全順式結(jié)構(gòu)的亞精胺類化合物1抑制作用最弱,亞精胺類化合物2和3抑制作用較好。此外,本文利用體外實驗方法,利用半自動凝血分析儀,研究了化合物對凝血酶原時間(PT)的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn)各化合物均無延長 PT

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