烏龍茶多糖理化性質及抗氧化、降血糖活性研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、近二十年來,茶多糖因其多種生理功效而備受關注,特別是抗氧化活性和降血糖作用。本論文以國內市場上三種發(fā)酵程度不同的烏龍茶(安溪鐵觀音、鳳凰單樅、武夷大紅袍)為原料,提取烏龍茶粗多糖,比較分析其理化性質和體外抗氧化、降血糖生理活性。之后,根據其生理活性,篩選出活性高的大紅袍茶多糖進行體內抗氧化,降血糖研究,并探討降血糖機理。同時,分離純化大紅袍茶多糖,研究分離產物的分子結構和化學成分,體內體外生理活性,初步探討構效關系。實驗結論如下:

2、>  1.以安溪鐵觀音、鳳凰單樅、武夷大紅袍為原料提取烏龍茶多糖,分別命名為TTPS、FTPS和DTPS其中DTPS得率最高,為1.84%,是得率最低的TTPS(0.83%)2倍以上。結合化學成分分析和紅外圖譜,表明這三種茶多糖是一類水溶性的酸性糖蛋白,主要有糖醛酸、中性糖和蛋白質三類物質構成,三者含量達70%以上,其中糖醛酸含量最高,中性糖其次,蛋白質最低。三者的蛋白質含量呈現極顯著差異(p<0.05),并隨發(fā)酵程度的加深而增加,其中

3、DTPS的含量最高(9.30%),TTPS則最低(5.57%)。氣相色譜GC分析三種烏龍茶多糖的單糖組分及摩爾比,發(fā)現它們都含有L-鼠李糖,D-巖藻糖,L-阿拉伯糖,D-木糖,D-甘露糖,D-葡萄糖,D-半乳糖這7種單糖,但摩爾比不同。凝膠色譜層析法檢測這三種烏龍茶多糖的分子量,發(fā)現其分子量較大,達到104~106數量級。
  通過對這三種烏龍茶多糖的體外生理活性研究表明,DTPS的抗氧化活性及對α-葡萄糖苷酶抑制作用最好,FTP

4、S其次,TTPS最弱,且與蛋白質含量呈顯著正相關(r>0.95)。而這可能與烏龍茶的發(fā)酵程度有關,發(fā)酵程度越大,其生理活性就越好。因為發(fā)酵程度會顯著影響茶多糖的化學組成(如蛋白質含量),分子量,分子間相互作用及構象,從而影響茶多糖的生理活性。
  2.根據上一章試驗結果,篩選出活性高的大紅袍茶多糖DTPS進一步體內活性研究。DTPS對四氧嘧啶誘導的糖尿病小鼠餐后血糖、空腹血糖、“三多一少”糖尿病癥狀、胰腺組織的影響研究表明,DTP

5、S能緩解糖尿病小鼠餐后血糖升高速度和幅度,縮短高血糖作用時間;緩解改善糖尿病“三多一少”癥狀;減輕四氧嘧啶誘導小鼠胰島損傷的作用,增加胰島數目,增大胰島面積;降低空腹血糖,且最佳作用時效為第2周。體內抗氧化活性研究表明,DTPS灌胃4周后,DTPS-40組小鼠血清和肝臟組織中的MDA含量都顯著下降, SOD和GSH-Px抗氧化酶活性顯著上升。
  綜合評價DTPS體內體外抗氧化、降血糖作用表明,大紅袍茶多糖是一種有效的抗氧化劑,能

6、通過直接清除自由基或提高體內抗氧化酶活性,抑制機體脂質過氧化反應,緩解自由基對細胞的損傷作用;DTPS對糖尿病有一定防治作用,其作用機制可能是:(1)通過抑制α-葡糖糖甘酶活性,抑制葡萄糖在小腸的吸收,降低餐后血糖;(2)緩解糖尿病機體胰島數目減少,胰島面積減小的癥狀,改善胰島功能,提高機體胰島素的供給;(3)通過抗氧化作用,減輕自由基對β細胞的損傷。
  3.大紅袍茶多糖DTPS經DEAE-52纖維素柱層析洗脫分離后得到4組分,

7、分別為DTPS-0,DTPS-1,DTPS-2和DTPS-3,其中0.2 mol/L NaCI洗脫的DTPS-2組分得率最高,為31.9%。洗脫分離后,4組分的蛋白質含量急劇下降至0.21%-0.83%,以糖醛酸和中性糖含量為主。HPLC檢測4組分的單糖成分表明,4組分都含有L-鼠李糖,D-甘露糖,D-葡萄糖,D-半乳糖,L-阿拉伯糖,木糖和半乳糖醛酸這7種單糖,但摩爾比不同。
  紅外圖譜,掃描電鏡和原子力顯微鏡分析4組分的結構

8、表明,4組分子結構中都具有多糖類物質和蛋白質的特征吸收峰,DTPS-0為含有呋喃環(huán)的糖蛋白復合物,DTPS-1、DTPS-2和DTPS-3則是含有吡喃糖的糖蛋白復合物;這些糖蛋白是由多個糖鏈相互締合成直徑為50-100nm的多糖分子,多個多糖分子相互纏繞成直徑500 nm左右的多糖顆粒,多糖顆粒相互聚合呈多層次片狀、無規(guī)線團狀、串珠狀等多種立體結構的復合物,且茶多糖中糖醛酸和蛋白含量越高,其空間結構就越復雜。
  體外分析4組分的

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