1、目的：研究神經(jīng)介素U(neuromedin U，NMU)對小鼠背根神經(jīng)節(jié)(dorsal rootganglion，DRG)神經(jīng)元T型鈣離子通道的作用及機制。
　　 方法：培養(yǎng)小鼠背根神經(jīng)節(jié)(DRG)神經(jīng)元細胞，采用分子生物學的方法鑒定DRG神經(jīng)元上NMU受體類型的表達。利用全細胞膜片鉗技術研究神經(jīng)介素U(NMU)對小直徑的DRG神經(jīng)元T型鈣電流的作用，并用藥理學方法研究其信號通路作用機制。
　　 結果：本實驗研究發(fā)現(xiàn)：⑴

2、不論在mRNA水平，還是蛋白水平，小鼠背根神經(jīng)節(jié)上只能見到NMUⅠ型受體表達而未見NMUⅡ型受體表達；⑵電生理研究表明，NMU對背根神經(jīng)節(jié)細胞上的T型鈣通道的抑制作用具有劑量依賴關系。1μM NMU對T型鈣通道的抑制率約為27.4％；⑶藥理學研究發(fā)現(xiàn)，NMU對T型鈣通道的抑制作用能夠被GDP-β-S(特異性G蛋白活性抑制劑)或PTX(百日咳毒素)所阻斷，表明NMU是通過Gi/oα亞基發(fā)揮作用。運用設置去極化前置脈沖以及電極內液添加G蛋白

3、βγ亞基阻斷劑QEHA的方法發(fā)現(xiàn)，Gβγ亞基并不參與NMU對T型鈣通道的調控。另外，用蛋白激酶A(PKA)的選擇性阻斷劑H89和PKI5-24預先孵育背根神經(jīng)節(jié)細胞后，NMU對T型鈣通道的抑制作用被翻轉，而孵育磷脂酶C選擇性阻斷劑U73122和蛋白激酶C(PKC)的選擇性阻斷劑GF109203X和Chelerythrine chloride則無此效果。⑷細胞興奮性研究發(fā)現(xiàn)，NMU能夠明顯降低小直徑背根神經(jīng)節(jié)細胞的放電頻率，抑制率為51.