釀酒酵母甘露聚糖的制備方法研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、酵母甘露聚糖存在于酵母細胞壁的外層,約占酵母細胞壁干重的40%,是一類具有顯著生理活性的微生物多糖。甘露聚糖具有增強免疫力,吸附霉菌毒素,抗腫瘤,抗氧化,降血脂,抗輻射等功能,廣泛應用于保健食品、醫(yī)藥和飼料工業(yè)。本課題研究了高甘露聚糖釀酒酵母的發(fā)酵培養(yǎng)條件、酵母細胞壁預處理方法、甘露聚糖提取及精制工藝,主要研究結果如下:
  高甘露聚糖釀酒酵母的培養(yǎng)。不同釀酒酵母菌株的細胞甘露聚糖含量差別很大,在所篩選的10株釀酒酵母中,菌株KD

2、10甘露聚糖含量最高。靜止期酵母細胞的甘露聚糖含量高于對數期。與葡萄糖相比,葡萄糖+乳糖為碳源時可顯著提高甘露聚糖含量。同酵母浸粉相比,酵母浸粉與蛋白胨復合作氮源時,甘露聚糖含量稍有增加,且菌體生長好于酵母浸粉單獨做氮源。碳氮比較低時,有利于甘露聚糖的合成。葉酸明顯促進了釀酒酵母KD10甘露聚糖的合成。滲透脅迫以及酒精脅迫使得細胞甘露聚糖含量上升。釀酒酵母KD10的最佳培養(yǎng)基為:37.5 g/L葡萄糖、12.5 g/L乳糖、37.5 g

3、/L酵母浸粉、37.5 g/L蛋白胨、0.3 g/L磷酸二氫鉀、0.3 g/L磷酸氫二鉀、0.5g/LMgSO4。
  酵母細胞壁的預處理方法研究。在適宜的自溶條件(pH6.0、水浴溫度55℃、保溫時間40 h)下,酵母KD10甘露聚糖釋放率為15.85%。采用蝸牛酶處理酵母細胞,甘露聚糖釋放率非常低,僅為0.31%。121℃高溫處理酵母細胞可大量釋放甘露聚糖。與高溫短時處理(121℃、30 min)相比,自溶+高溫處理、機械破壁

4、+高溫處理可顯著提高甘露聚糖釋放率,但與高溫長時處理(121℃、2h)相比,它們的甘露聚糖釋放率差異并不顯著。釀酒酵母高溫處理的適宜條件為:菌懸液濃度15%,pH7.0,處理溫度121℃,處理時間10h,其甘露聚糖釋放率達95.89%。
  甘露聚糖的提取與純化。甘露聚糖上清液濃縮倍數、乙醇濃度對甘露聚糖提取影響顯著。隨著醇沉溫度的升高,甘露聚糖粗糖產量逐漸降低。醇沉pH對甘露聚糖提取影響不顯著。醇沉時間為0.25~10 h時,甘

5、露聚糖粗糖產量和純度幾乎沒有差異。當醇沉時間超過10h時,甘露聚糖產量明顯下降。適宜的甘露聚糖醇沉工藝條件為:上清液濃縮倍數6,pH7.0,醇沉溫度4℃,乙醇濃度90%,時間1h。所制備的甘露聚糖純度和產量分別22.24%和92.60 mg/g。采用分級醇沉的方法可制備不同純度的甘露聚糖。甘露聚糖粗糖經過截留分子量3500、7500、14000的透析袋膜分離后,其純度明顯提高,其中截留分子量3500的透析袋效果最好,甘露聚糖純度達到36

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